一、细胞基本属性
- 细胞名称:HEPA1-6+LUC小鼠肝癌细胞(荧光素酶标记)
- 细胞别称:HEPA1-6 - LUC;Luc - Hepa;荧光素酶报告基因肝癌细胞
- 种属来源:小鼠(Mus musculus,C57BL/6背景)
- 模型背景:通过慢病毒转导将荧光素酶基因(Luciferase)稳定整合至HEPA1-6细胞基因组
- 组织来源:小鼠肝癌组织(经原位移植模型传代建立)
- 生长特性:贴壁生长(依赖高血清培养基)
- 细胞形态:上皮样,单层贴壁后呈多边形或梭形
- 细胞代数:推荐使用P5 - P15代(确保荧光素酶活性稳定)
- 细胞规格:1×10^6 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
- 培养基:DMEM高糖培养基(含10% FBS+1%双抗)
- 培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂),液氮长期保存
- 荧光素酶活性:≥5×10^4 RLU/秒/细胞(经体内外生物发光验证)
- 供应限制:仅限肿瘤机制研究或药物筛选等科研用途
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:
- 冻存管:37℃水浴解冻后离心去冻存液,重悬于预热培养基
- 培养瓶:酒精消毒后直接置于培养箱,4小时后首次换液
- 传代标准:细胞融合度达80%-90%(推荐每2 - 3天传代一次)
- 传代比例:1:3至1:5(接种密度建议2×10^4 cells/cm²)
- 消化方法:
- 使用0.25% Trypsin - EDTA(含0.02% EDTA)
- 37℃消化30秒 - 1分钟,轻拍瓶壁促使细胞脱落
- 注意事项:
- 避免过度消化(可能损伤荧光素酶表达载体)
- 传代后6小时补充新鲜培养基以维持细胞活性
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO+20% FBS)
- 细胞密度:冻存浓度:5×10^6 cells/mL
- 冻存步骤:
- 离心收集细胞后轻柔重悬于冻存液
- 程序降温:4℃ 30分钟 → -80℃过夜 → 液氮储存
- 复苏验证:
- 复苏后12小时检测存活率(要求≥90%)
- 功能验证:荧光素酶活性检测(化学发光法)
四、售后服务承诺
- 重发标准:
- 1.运输过程干冰耗尽导致细胞失活(需提供物流温度记录)
- 2.7天内证实荧光素酶活性缺失(需提供检测原始数据)
- 3.细胞污染经第三方检测确认(支原体/细菌/真菌)
- 4.细胞STR分型与数据库不匹配
- 不予重发情形:
- 1.未使用推荐培养基导致荧光素酶表达衰减
- 2.自行进行基因编辑操作后出现异常
- 3.复苏后未按时传代导致细胞老化
- 4.未按规范进行生物安全防护引发污染