一、细胞基本属性
- 细胞名称：HEPA1-6小鼠肝癌细胞
- 细胞别称：小鼠肝癌细胞系；HEPA1-6细胞
- 种属来源：小鼠（Mus musculus）
- 背景来源：C57/L小鼠肝脏肿瘤组织
- 组织来源：肝脏组织（化学诱导肝癌模型）
- 生长特性：贴壁生长（需胶原蛋白包被培养器皿）
- 细胞形态：上皮样，单层贴壁，核质比高
- 细胞代数：P5 - P15（确保遗传稳定性与功能性）
- 细胞规格：1×10^6 cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含无血清冻存液）
- 培养基：DMEM高糖培养基（含10% FBS + 1%青霉素/链霉素）
- 培养条件：气相：5% CO₂；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含10% DMSO及细胞保护剂），-150℃以下长期保存
- 倍增时间：约24 - 48小时（与培养密度及传代操作相关）
- 供应限制：仅限科研用途，不可用于临床治疗或活体实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理：
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，加入5mL预热培养基离心后重悬接种。
- 培养瓶：酒精消毒外表面，静置于培养箱1小时平衡后更换新鲜培养基。
- 传代标准：细胞融合度达80% - 90%（建议每2 - 3天传代一次）。
- 传代比例：1:3至1:5（推荐接种密度1×10^4 cells/cm²）。
- 消化方法：使用0.25%胰酶 - EDTA溶液，37℃消化2 - 3分钟，显微镜下观察细胞边缘卷曲后终止。
- 注意事项：
- 避免消化时间过长（防止细胞膜损伤）。
- 传代后12小时内避免频繁移动培养瓶，确保贴壁稳定性。
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO及葡萄糖缓冲体系）。
- 冻存密度：1×10^6 - 5×10^6 cells/mL（离心后重悬于冻存液）。
- 冻存步骤：梯度降温程序：4℃ 30分钟 → -20℃ 2小时 → -80℃过夜 → 转移至液氮长期储存。
- 复苏验证：
- 复苏后48小时内检测细胞存活率（台盼蓝染色法，存活率≥90%）。
- 功能验证：CCK - 8法检测增殖活性（P10代细胞增殖曲线需符合标准）。
四、售后服务承诺
- 重发标准：
- 运输过程中干冰耗尽或温度记录异常（需提供物流温度监测截图）。
- 到货3天内检测出支原体污染（需提供第三方检测报告）。
- 细胞复苏后存活率低于85%（需提供台盼蓝染色图及操作视频）。
- 细胞STR鉴定与数据库不匹配。
- 不予重发情形：
- 客户未按推荐条件培养导致细胞状态异常（如使用非贴壁培养体系）。
- 细胞冻存后未及时转移至液氮（-80℃保存超过1个月）。
- 自行修改培养基配方导致增殖异常。
- 未按规范进行细胞支原体检测而直接用于实验。
注：所有操作需遵守生物安全规范，实验废弃物需按生物危害物处理。
