一、细胞基本属性
- 细胞名称:HC11小鼠乳腺上皮细胞
- 细胞别称:小鼠乳腺上皮细胞;HC - 11细胞
- 种属来源:小鼠(Mus musculus)
- 组织来源:乳腺上皮组织
- 生长特性:贴壁生长(依赖胶原基质或特定细胞外基质)
- 细胞形态:典型上皮样,铺路石状或多角形单层结构
- 细胞代数:P3 - P8(维持细胞功能稳定性与分化潜能)
- 细胞规格:1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
- 培养基:RPMI 1640培养基(含10% FBS、胰岛素、表皮生长因子及抗生素)
- 培养条件:气相:5% CO₂+95%空气;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂),-150℃以下长期保存
- 供应限制:仅限科研用途,不可用于临床或动物实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,离心后重悬于预热培养基接种
- 培养瓶:酒精消毒表面,静置培养箱4小时待细胞贴壁
- 传代标准:细胞融合度达80% - 90%(通常每2 - 3天传代一次)
- 传代比例:1:3至1:4(推荐接种密度4×10³cells/cm²)
- 消化方法:
- 使用0.25%胰酶 - EDTA(含Ca²⁺/Mg²⁺)
- 37℃消化3 - 5分钟,轻拍瓶壁促使细胞脱落,立即终止反应
- 注意事项:
- 避免过度传代(建议使用P8代以内细胞)
- 换液时保留部分条件培养基以维持细胞活性
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO及糖原保护剂)
- 细胞密度:冻存浓度:5×10⁵-1×10⁶cells/mL
- 冻存步骤:
- 消化后离心收集细胞,重悬于冻存液分装至冻存管
- 程序降温:4℃ 30分钟→ - 20℃ 2小时→ - 80℃过夜→液氮长期保存
- 复苏验证:
- 复苏后48小时检测细胞贴壁率(正常≥85%)
- 功能验证:β - 酪蛋白诱导分化实验(P5代细胞应保留分化潜能)
四、售后服务承诺
- 重发标准:
- 运输过程温度异常导致细胞死亡(需提供温度记录证据)
- 5日内证实支原体/真菌污染(需提供荧光染色或PCR报告)
- 复苏后贴壁率低于80%(需提供培养24小时显微照片)
- 细胞种属鉴定与描述不符
- 不予重发情形:
- 客户未按推荐培养基培养导致功能异常
- 自行改良培养条件引发的细胞状态问题
- 未进行梯度复苏直接高温解冻
- 超说明书用途导致的实验失败
(注:所有操作需符合生物安全规范,细胞特性可能因培养条件存在批次差异。)