一、细胞基本属性
细胞名称:H22小鼠肝癌细胞
细胞别称:H22细胞;小鼠肝癌细胞株
种属来源:小鼠(Mus musculus)
年龄性别:BALB/c成年小鼠(性别不限,供体无特定病原体感染史)
组织来源:肝癌组织(化学诱导法建立)
生长特性:悬浮聚集体生长(部分实验室可贴壁培养)
细胞形态:悬浮时为圆形或类球形,贴壁时呈上皮样或多角形
细胞代数:P3 - P8(维持肿瘤细胞表型稳定性)
细胞规格:1×10^6 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含血清冻存液)
培养基:RPMI 1640(含10% FBS+1%双抗)
培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件:含10% DMSO的冻存液,-150℃以下长期保存
倍增时间:约24 - 48小时(与接种密度及培养条件相关)
供应限制:仅限科研用途,不可用于临床或活体移植
二、细胞培养操作指南
收货处理:
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,离心去除冻存液后重悬于预热培养基
- 悬浮培养:直接转移至培养瓶,维持密度1×10^5 - 5×10^5 cells/mL
传代标准:悬浮细胞密度达1×10^6 cells/mL或贴壁细胞融合度达80% - 90%
传代比例:悬浮细胞按1:3至1:5稀释,贴壁细胞按1:2至1:3接种
消化方法:
- 贴壁培养时使用0.25%胰酶 - EDTA
- 37℃消化2 - 3分钟,离心去除消化液后重悬
注意事项:
- 悬浮细胞需定期摇匀防止聚团
- 贴壁培养时避免消化过度损伤膜蛋白
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方:基础培养基+20% FBS+10% DMSO
细胞密度:冻存浓度:5×10^6 - 1×10^7 cells/mL
冻存步骤:
- 离心收集细胞,重悬于冻存液分装至冻存管
- 程序降温:4℃ 30min → -80℃ 24h → 液氮长期保存
复苏验证:
- 复苏存活率≥90%(台盼蓝染色法)
- 功能验证:裸鼠皮下成瘤实验(P5代细胞应保持致瘤性)
四、售后服务承诺
重发标准:
1. 运输过程温度异常导致细胞失活(需提供物流温度记录)
2. 到货72小时内证实细菌/真菌污染(需提供污染检测图)
3. 细胞活率低于90%(提供台盼蓝染色结果)
4. 种属鉴定与描述不符(需STR比对报告)
不予重发情形:
1. 未按悬浮/贴壁特性选择培养方法导致细胞死亡
2. 使用非推荐培养基或血清浓度不当
3. 未定期检测支原体造成实验污染扩散
4. 液氮保存设备故障导致的冻存管破裂