一、细胞基本属性
细胞名称
GT1 - 1小鼠垂体瘤细胞
细胞别称
GT1 - 1细胞;小鼠垂体瘤细胞系
种属来源
小鼠(Mus musculus)
背景特征
源自C57BL/6小鼠垂体促性腺激素分泌瘤,具有神经内分泌特性
组织来源
垂体肿瘤组织
生长特性
贴壁生长(需胶原蛋白包被培养器皿)
细胞形态
不规则多边形或梭形,细胞间连接松散
细胞代数
P3 - P10(建议传代至第10代内以维持表型稳定性)
细胞规格
1×10^6 cells/T25培养瓶 或1mL冻存管(含无血清冻存液)
培养基
DMEM/F12培养基(含10% FBS+1%双抗+10mM HEPES缓冲液)
培养条件
气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件
无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂),液氮长期保存
倍增时间
约24 - 48小时(依赖培养密度与血清浓度)
供应限制
仅限科学研究,不可用于临床或药物生产
二、细胞培养操作指南
收货处理
• 冻存管:37℃水浴快速解冻,离心去冻存液后重悬于预热培养基
• 培养瓶:酒精擦拭表面后静置培养箱1小时适应环境
传代标准
细胞融合度达80% - 90%(建议每2 - 3天传代一次)
传代比例
1:3至1:4(推荐接种密度3×10⁴ cells/cm²)
消化方法
• 使用0.25%胰蛋白酶 - EDTA溶液
• 37℃消化30 - 60秒,轻拍瓶壁促使细胞脱落
注意事项
• 消化后需完全中和胰酶(残留酶影响贴壁)
• 首次传代后48小时内避免换液
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方
无血清冻存液(含10% DMSO及胎牛血清)
细胞密度
冻存浓度:5×10⁵ - 1×10⁶ cells/mL
冻存步骤
• 离心收集细胞后轻柔重悬于冻存液
• 程序降温:4℃ 30分钟 → - 80℃ 过夜 → 液氮储存
复苏验证
• 复苏后48小时检测存活率(台盼蓝染色≥90%)
• 功能验证:GnRH分泌检测(P5代细胞应维持激素分泌能力)
四、售后服务承诺
重发标准
1. 运输温度异常导致细胞失活(需提供物流温度记录)
2. 到货7天内证实微生物污染(需提供检测报告)
3. 细胞活力低于85%(经台盼蓝染色确认)
4. 物种鉴定与描述不符
不予重发情形
1. 未按推荐方法进行胶原包被培养
2. 使用非标准培养基导致细胞分化
3. 传代次数超过推荐代数引发变异
4. 未进行定期支原体检测导致交叉污染