一、细胞基本属性
细胞名称：GL-261+luc小鼠胶质细胞瘤荧光素酶标记细胞
细胞别称：GL-261荧光素酶标记胶质瘤细胞；GL - 261 - luc
种属来源：小鼠（Mus musculus）
背景品系：C57BL/6小鼠来源
组织来源：胶质瘤组织（经基因工程改造稳定表达荧光素酶）
生长特性：贴壁生长（需胶原包被培养器皿）
细胞形态：不规则梭形或星形，成簇增殖
细胞代数：P5 - P15（荧光素酶活性稳定传代区间）
细胞规格：1×10^6 cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含血清冻存液）
培养基：DMEM高糖培养基（含10% FBS+1%双抗+2μg/mL嘌呤霉素维持筛选）
培养条件：气相：5% CO₂；温度：37℃；湿度：95%
冻存条件：含血清冻存液（含10% DMSO及细胞保护剂），-150℃以下长期保存
荧光素酶活性：≥1×10^5 RLU/μg蛋白（经IVIS系统验证）
应用限制：仅限肿瘤机制研究及药物筛选，不可用于临床或体内回输
二、细胞培养操作指南
收货处理：
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，离心后重悬于预热培养基
- 培养瓶：酒精擦拭表面后直接置于培养箱，24小时内更换培养基
传代标准：细胞融合度达80% - 90%（传代间隔约3 - 4天）
传代比例：1:3至1:5（推荐接种密度2×10^4 cells/cm²）
消化方法：
- 使用0.25%胰酶 - EDTA（含钙镁离子）
- 37℃消化3 - 5分钟，轻拍瓶壁促使细胞脱落
注意事项：
- 传代后需维持嘌呤霉素筛选压力
- 避免细胞过度融合导致荧光素酶表达下降
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方：含血清冻存液（10% DMSO+90% FBS）
细胞密度：冻存浓度5×10^6 cells/mL
冻存步骤：
- 消化离心后重悬于冻存液，分装至冻存管
- 梯度降温：4℃ 30分钟→ - 80℃ 24小时→液氮长期保存
复苏验证：
- 复苏后48小时检测荧光素酶活性（底物为D - 荧光素）
- 活细胞率≥90%（台盼蓝染色法）
四、售后服务承诺
重发标准：
1. 运输过程温度异常导致细胞失活（需提供物流温度记录）
2. 7天内证实支原体污染（需提供第三方检测报告）
3. 荧光素酶活性低于标称值50%（需提供原始检测数据）
不予重发情形：
1. 未按时添加筛选抗生素导致标记丢失
2. 使用非推荐胶原包被培养器皿
3. 体内实验未通过生物安全伦理审查
4. 未定期检测荧光素酶活性导致实验失败
（以上内容基于标准操作流程制定，具体实验需根据研究目的调整方案）
