一、细胞基本属性
- 细胞名称:GL - 261小鼠胶质细胞瘤细胞
- 细胞别称:GL - 261胶质瘤细胞;C57BL/6胶质瘤模型细胞
- 种属来源:小鼠(Mus musculus)
- 背景品系:C57BL/6(常用于同源移植模型)
- 组织来源:化学诱导的胶质瘤组织
- 生长特性:贴壁生长(可形成致密单层或悬浮聚集)
- 细胞形态:不规则多边形或梭形,核质比高,可见伪足
- 细胞代数:P5 - P15(建议使用前验证增殖速率)
- 细胞规格:1×10⁶ cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含专用冻存液)
- 培养基:DMEM高糖培养基(含10%FBS + 1%青霉素/链霉素)
- 培养条件:气相:5%CO₂;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含10%DMSO + 90%FBS),-150℃以下长期保存
- 增殖周期:~24 - 36小时(与传代密度相关)
- 应用范围:胶质瘤机制研究、药物筛选、侵袭转移实验(仅限科研)
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,离心后重悬于预热培养基
- 培养瓶:75%酒精表面消毒后直接置于CO₂培养箱
- 传代标准:细胞融合度达80% - 90%(过密易自发分化)
- 传代比例:1:3至1:5(推荐接种密度2×10⁴ cells/cm²)
- 消化方法:
- 使用0.25%胰酶 - EDTA(含Ca²⁺/Mg²⁺)
- 37℃消化2 - 3分钟,轻拍瓶壁促使脱落
- 注意事项:
- 避免多次离心(易损伤细胞膜完整性)
- 首次传代前建议更换新鲜培养基平衡12小时
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:90%完全培养基+10%DMSO
- 细胞密度:冻存浓度5×10⁶ - 1×10⁷ cells/mL
- 冻存步骤:
- 消化后离心收集细胞,重悬于预冷冻存液
- 程序降温:4℃ 30分钟 → -80℃ 24小时 → 液氮长期保存
- 复苏验证:
- 复苏存活率≥85%(台盼蓝染色法)
- 功能验证:体外侵袭实验(Matrigel法)或GFAP免疫荧光标记
四、售后服务承诺
- 重发标准:
- 干冰运输温度记录异常(需提供物流温度监测报告)
- 到货48小时内证实支原体污染(需第三方检测报告)
- 细胞复苏后贴壁率低于80%(需提供接种后24小时显微照片)
- STR分型与数据库不匹配(需提供完整电泳图谱)
- 不予重发情形:
- 使用非指定培养基导致细胞表型改变
- 未按规范进行传代(如机械刮除法代替酶消化)
- 未定期进行支原体预防性检测
- 实验操作污染导致细胞交叉感染
(注:本产品适用于胶质瘤基础研究,严禁用于临床或活体生物安全三级以上实验)