一、细胞基本属性
- 细胞名称:GC-2 SPd(ts)小鼠精母细胞系
- 细胞别称:小鼠精母细胞系;GC-2细胞系
- 种属来源:小鼠(Mus musculus)
- 年龄性别:健康雄性幼鼠(供体经遗传背景及生殖健康筛查)
- 组织来源:睾丸组织精母细胞分离培养
- 生长特性:贴壁生长(依赖特定细胞外基质包被)
- 细胞形态:典型圆形或多边形单层,接触抑制后呈现紧密排列
- 细胞代数:P3 - P10(维持遗传稳定性及功能特征)
- 细胞规格:1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含专用冻存液)
- 培养基:高糖DMEM培养基(含10% FBS+1%非必需氨基酸+1%丙酮酸钠)
- 培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃(温度敏感型特性需按实验需求调整);湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂),液氮气相长期保存
- 倍增时间:约24 - 36小时(依赖培养密度及血清浓度)
- 供应限制:仅限科学研究,不可用于临床或活体移植
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,离心去除冻存液后重悬于预热培养基
- 培养瓶:75%酒精表面消毒,静置30分钟后移入培养箱
- 传代标准:细胞融合度达80% - 90%(建议每2 - 3天传代)
- 传代比例:1:3至1:4(推荐初始接种密度1×10^4 cells/cm²)
- 消化方法:
- 使用0.25%胰酶 - EDTA溶液(含Ca²⁺/Mg²⁺平衡液)
- 37℃消化2 - 3分钟,轻拍瓶壁促使细胞脱落,立即加入含血清培养基终止
- 注意事项:
- 避免消化过度(影响细胞膜完整性及后续贴壁)
- 传代后6小时内避免移动培养瓶以保证贴壁稳定性
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO及海藻糖保护剂)
- 细胞密度:冻存浓度1×10^6 - 3×10^6 cells/mL
- 冻存步骤:
- 消化离心后重悬细胞于冻存液,分装至冻存管
- 程序降温:4℃平衡30分钟→ - 80℃冷冻过夜→液氮长期储存
- 复苏验证:
- 复苏后12小时检测细胞存活率(台盼蓝染色≥90%)
- 功能验证:通过流式细胞术检测生精细胞标志物(如VASA蛋白表达)
四、售后服务承诺
- 重发标准:
- 1. 运输过程温度记录异常导致细胞失活(需提供物流温度监控证明)
- 2. 到货72小时内证实微生物污染(需提供第三方检测报告)
- 3. 复苏后存活率低于85%(需提供台盼蓝染色图像)
- 4. 细胞STR鉴定与数据库不匹配
- 不予重发情形:
- 1. 未按说明书要求进行温度敏感型特性相关操作
- 2. 使用非指定培养基或血清导致细胞分化异常
- 3. 未定期进行支原体检测引发交叉污染
- 4. 解冻后培养超过48小时未进行换液操作
(注:本产品需在生物安全二级实验室操作,所有操作应符合伦理规范)