一、细胞基本属性
- 细胞名称:EMT6小鼠乳腺癌细胞
- 细胞别称:EMT - 6;Murine mammary carcinoma cells
- 种属来源:小鼠(Mus musculus)
- 年龄性别:雌性BALB/c小鼠诱导的乳腺肿瘤组织
- 组织来源:乳腺肿瘤组织
- 生长特性:贴壁生长(依赖胶原蛋白包被培养器皿)
- 细胞形态:不规则多边形或纺锤形,聚集性生长
- 细胞代数:P5 - P10(维持肿瘤细胞表型稳定性)
- 细胞规格:1×10^6 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含专用冻存液)
- 培养基:RPMI 1640培养基(含10% FBS+1%青霉素/链霉素+2mM L - 谷氨酰胺)
- 培养条件:气相:5% CO₂+95%空气;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含DMSO及肿瘤细胞保护剂),- 150℃以下长期保存
- 倍增时间:约24 - 36小时(高增殖活性,需定期传代)
- 供应限制:仅限肿瘤机制研究及药物筛选,不可用于体内移植或临床相关实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,离心后重悬于预热培养基
- 培养瓶:75%酒精表面消毒后直接置于CO₂培养箱
- 传代标准:细胞融合度达80% - 90%(高密度易引发自发分化)
- 传代比例:1:3至1:5(推荐接种密度1×10^4 cells/cm²)
- 消化方法:
- 使用0.25%胰蛋白酶 - EDTA溶液(含0.02% EDTA)
- 37℃消化2 - 3分钟,轻柔拍打至细胞脱落
- 注意事项:
- 避免消化时间过长(可能导致细胞膜损伤)
- 传代后48小时内监测细胞贴壁及增殖状态
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:专用无血清冻存液(含10% DMSO+90% FBS)
- 细胞密度:冻存浓度:5×10^6 - 1×10^7 cells/mL
- 冻存步骤:
- 离心收集对数生长期细胞,重悬于冻存液
- 程序降温:4℃ 30分钟→ - 80℃ 24小时→液氮长期保存
- 复苏验证:
- 复苏后存活率≥85%(台盼蓝染色法)
- 功能验证:软琼脂克隆形成实验(P5代细胞应保持成瘤特性)
四、售后服务承诺
- 重发标准:
- 运输过程温度异常导致细胞失活(需提供物流温度记录)
- 7日内证实真菌/细菌污染(需提供污染检测报告)
- 细胞复苏存活率低于80%(需提供染色检测视频)
- 细胞STR分型与数据库不匹配
- 不予重发情形:
- 使用非标准培养基导致细胞表型改变
- 未按规范进行传代造成细胞衰老
- 实验操作污染导致交叉感染
- 超过建议代数(P10)仍要求质保