一、细胞基本属性
细胞名称：E14小鼠胚胎干细胞
细胞别称：E14 ES细胞；胚胎干细胞系E14
种属来源：小鼠（Mus musculus）
组织来源：129/Ola品系雄性胚胎
生长特性：贴壁生长（依赖滋养层或基质胶）
细胞形态：集落型生长，边缘清晰，胞体透亮呈圆形隆起
细胞代数：P15 - P25（维持多能性稳定表达）
细胞规格：1×10^6 cells/T25培养瓶 或 1mL冻存管（含ES专用冻存液）
培养基：高糖DMEM（含15% ES级FBS+1%非必需氨基酸+0.1mM β - 巯基乙醇+10^3 U/mL LIF）
培养条件：气相：5% CO₂ + 95%空气；温度：37℃；湿度：95%
冻存条件：ES专用冻存液（含DMSO及血清替代物），液氮气相长期保存
传代周期：48 - 72小时（视集落密度调整）
应用限制：仅限基础研究，不可用于生殖工程或人体移植
二、细胞培养操作指南
初始处理：
- 冻存细胞：37℃水浴快速复苏，预铺明胶包被培养皿
- 活细胞：直接转移至预平衡培养体系
传代标准：集落直径达300 - 500μm（通常每2 - 3天传代）
离散方法：
- 使用0.25% Trypsin - EDTA（含1mg/mL胶原酶IV）
- 37℃消化3 - 5分钟，轻柔吹打至单细胞悬液
接种密度：1×10^4 cells/cm²（维持自我更新状态）
关键注意：
- 每日更换培养基确保LIF活性
- 严格监测OCT4/Nanog表达水平
- 传代后12小时观察集落形成效率
三、细胞冻存操作规范
冻存准备：
- 冻存液：90% ES培养基+10% DMSO
- 细胞浓度：1×10^6 cells/mL
程序控制：
- 4℃预冷30分钟
- 程序降温仪以-1℃/min速率降至-80℃
- 24小时内转移至液氮罐
质检标准：
- 复苏存活率≥85%（AO/PI双染色法）
- 多能性验证：体外拟胚体形成实验（传代20次内应保持分化潜能）
四、售后服务承诺（未在原文中明确提及“售后服务承诺”相关表述，根据四、质量保障体系部分内容推测）
质控项目：
- 核型分析（保证40条染色体完整性）
- 支原体检测（每月PCR抽检）
- 表面标志物：SSEA - 1阳性率＞95%
- 分化能力验证：三胚层标记物免疫荧光
争议处理：
受理条件：
1. 到货干冰耗尽导致细胞失活
2. 支原体污染经第三方验证
3. 核型异常率＞10%
4. 自发分化率＞15%
免责条款：
1. 使用非指定培养基超过48小时
2. 未按时传代导致分化
3. 机械吹打过度破坏细胞膜
4. 未执行定期核型检测
注：本产品需在生物安全二级实验室操作，建议传代20代内完成关键实验。定期进行碱性磷酸酶染色监测未分化状态，建议每三个月复苏原始代次细胞重置培养体系
