一、细胞基本属性
- 细胞名称:E0771小鼠髓样乳腺癌细胞
- 细胞别称:E0771细胞;小鼠乳腺癌细胞;髓样乳腺癌细胞
- 种属来源:小鼠(Mus musculus)
- 品系背景:C57BL/6小鼠(乳腺组织原位肿瘤模型来源)
- 组织来源:髓样乳腺癌组织
- 生长特性:贴壁生长(依赖细胞间接触及基质支撑)
- 细胞形态:不规则多边形或梭形,核质比高,成簇增殖
- 细胞代数:P5 - P15(建议使用代数以保证肿瘤原代特性)
- 细胞规格:1×10^6 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
- 培养基:RPMI - 1640培养基(含10% FBS+1%青霉素/链霉素)
- 培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂),液氮长期保存
- 倍增时间:约24 - 36小时(受细胞密度及血清批次影响)
- 供应限制:仅限肿瘤机制研究,不可用于临床或体内移植实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:冻存管需37℃水浴快速解冻,离心后重悬于预热培养基;培养瓶经酒精消毒后静置4小时再观察贴壁情况。
- 传代标准:细胞融合度达80% - 90%(建议每2 - 3天传代一次)。
- 传代比例:1:3至1:5(推荐接种密度2×10^4 cells/cm²)。
- 消化方法:使用0.25%胰酶 - EDTA,37℃消化3 - 5分钟,加入含血清培养基终止反应。
- 注意事项:避免频繁观察影响贴壁稳定性;传代后48小时内避免换液以维持肿瘤细胞分泌因子。
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:基础培养基+20% FBS+10% DMSO。
- 细胞密度:冻存浓度1×10^6 - 5×10^6 cells/mL。
- 冻存步骤:离心收集细胞,重悬于冻存液后分装至冻存管,程序降温:4℃ 30分钟→ - 80℃过夜→液氮储存。
- 复苏验证:存活率≥85%(台盼蓝法);功能验证需通过小鼠皮下成瘤实验检测致瘤性。
四、售后服务承诺
- 重发标准:
- 干冰运输失效导致细胞死亡(需提供温度记录证据)
- 到货72小时内证实支原体污染(需提供检测报告)
- 细胞复苏存活率低于85%
- 物种鉴定与描述不符(STR检测结果为准)
- 不予重发情形:
- 未按规范使用含高浓度血清的专用培养基
- 未在液氮储存导致反复冻融
- 实验操作污染(如未在超净台操作)
- 超过建议代数(P15)后出现的特性偏移