CT26+LUC小鼠结肠癌细胞荧光素酶标记

小鼠细胞系

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XM-X00201×10^6小鼠细胞系3000


一、细胞基本属性

细胞名称:CT26+LUC小鼠结肠癌细胞荧光素酶标记株

细胞别称:CT26 - luc;荧光素酶标记结肠癌细胞;CT26 - LUC2

种属来源:小鼠(Mus musculus)

组织来源:结肠癌组织(经N - 亚硝基 - N - 甲基脲诱导构建)

生长特性:贴壁生长(偶见半悬浮聚集)

细胞形态:不规则梭形或多边形,核质比高,边缘透亮

荧光标记:稳定表达萤火虫荧光素酶(Luciferase),需配合D - 荧光素底物显影

细胞代数:P5 - P15(建议使用10代以内以维持标记稳定性)

细胞规格:1×10^6 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)

培养基:RPMI 1640(含10% FBS+2mM L - 谷氨酰胺+1%双抗)

培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%

冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂),液氮长期保存

增殖能力:倍增时间约18 - 24小时(指数生长期)

应用范围:肿瘤侵袭转移研究、活体成像药效评估(需遵守生物安全规范)


二、细胞培养操作指南

收货处理:

- 冻存管:37℃水浴快速解冻,离心去除冻存液后重悬于预热培养基

- 贴壁培养:接种后静置4小时再补充新鲜培养基(减少漂浮细胞)

传代标准:融合度达80% - 90%(高增殖特性需密切观察)

传代比例:1:5至1:8(推荐接种密度1×10^4 cells/cm²)

消化方法:

- 使用0.25%胰蛋白酶 - EDTA(含酚红指示)

- 37℃消化2 - 3分钟,轻拍瓶壁促使细胞脱落

注意事项:

- 传代后6小时内避免移动培养瓶(促进贴壁)

- 每周进行荧光素酶活性抽检(防止标记丢失)


三、细胞冻存操作规范

冻存液配方:基础培养基+20% FBS+10% DMSO

冻存密度:5×10^6 cells/mL(高密度提升复苏效率)

冻存步骤:

- 对数生长期收集细胞,4℃预冷冻存液重悬

- 程序降温:4℃ 30分钟→ - 80℃过夜→液氮气相保存

质控标准:

- 复苏存活率≥90%(台盼蓝检测)

- 生物发光强度验证:接种24小时后注射150mg/kg D - 荧光素,IVIS成像检测光子通量


四、售后服务承诺

重发条件:

1. 到货干冰完全挥发或温度记录> - 60℃(需提供物流温度记录)

2. 到货72小时内经qPCR证实支原体污染

3. 荧光素酶活性缺失(IVIS检测光子值低于1×10^4 p/s/cm²)

免责情形:

1. 未使用指定浓度嘌呤霉素维持筛选压力

2. 活体成像时未使用无红光饲料导致背景干扰

3. 长时间传代后未进行单克隆化筛选(超过P15代)


(注:本产品需配合II级生物安全柜操作,动物实验需遵守所在机构伦理审查规定)