一、细胞基本属性
细胞名称:C3H/10T1/2 Clone8小鼠胚胎成纤维细胞
细胞别称:10T1/2细胞;小鼠胚胎成纤维细胞系
种属来源:小鼠(Mus musculus)
年龄性别:胚胎期(C3H品系小鼠)
组织来源:胚胎组织
生长特性:贴壁生长(依赖细胞外基质附着)
细胞形态:成纤维细胞样长梭形,单层贴壁时呈交织网状
细胞代数:P3 - P10(建议使用前5代以维持分化潜能)
细胞规格:1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
培养基:DMEM高糖培养基(含10% FBS+1%双抗)
培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂), -150℃以下长期保存
倍增时间:约24 - 48小时(受血清浓度与传代密度影响)
供应限制:仅限科研用途,不可用于临床或体内实验
二、细胞培养操作指南
收货处理:冻存管:37℃水浴快速解冻,离心后重悬于预热培养基;培养瓶:酒精消毒表面后直接置于CO₂培养箱平衡
传代标准:细胞融合度达80% - 90%(建议每2 - 3天传代一次)
传代比例:1:3至1:6(推荐接种密度3×10³ cells/cm²)
消化方法:使用0.25%胰蛋白酶 - EDTA溶液,37℃消化1 - 3分钟,显微镜下观察细胞边缘卷曲后立即终止消化
注意事项:避免过度传代导致自发分化潜能下降;培养时需维持血清浓度稳定以保证增殖活性
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO+90% FBS)
细胞密度:冻存浓度:1×10⁶ - 5×10⁶ cells/mL
冻存步骤:消化离心后重悬于冻存液,分装至冻存管;程序降温:4℃ 30分钟 → -80℃过夜 → 液氮长期保存
复苏验证:复苏后存活率≥90%(台盼蓝染色法确认);功能验证:建议通过成骨/成脂分化实验验证多向分化能力
四、售后服务承诺
重发标准:1.运输温度异常导致细胞死亡(需提供物流温度记录);2.到货72小时内检测出支原体污染(需提供检测报告);3.细胞复苏存活率低于85%;4.STR鉴定与小鼠品系不符
不予重发情形:1.收货后超72小时未处理细胞;2.使用非推荐培养基导致形态异常;3.未按规范进行传代操作;4.未定期进行支原体检测导致实验污染