一、细胞基本属性
细胞名称:C17.2小鼠神经干细胞(C17.2 Mouse Neural Stem Cells)
细胞别称:C17.2神经祖细胞;小鼠神经干细胞系
种属来源:小鼠(Mus musculus)
背景来源:永生化的神经干细胞系,源于新生小鼠小脑组织
生长特性:贴壁生长(依赖聚 - L - 鸟氨酸或层粘连蛋白包被)
细胞形态:单层生长,呈梭形或多极突起状,可形成神经球样聚集体
细胞代数:P5 - P15(建议使用代数范围内以确保增殖潜能)
细胞规格:1×10⁶ cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含专用冻存液)
培养基:DMEM/F12基础培养基(含2% B27添加剂+20ng/mL EGF+20ng/mL bFGF)
培养条件:气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂),-150℃以下长期保存
增殖能力:传代周期约48 - 72小时(依赖生长因子浓度及基质包被)
应用限制:仅限科研用途,不可用于临床或体内移植实验
二、细胞培养操作指南
收货处理:
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,离心后重悬于预热培养基接种
- 培养瓶:75%酒精表面消毒后静置培养箱1小时再观察
传代标准:细胞融合度达80% - 90%(建议每3 - 4天传代一次)
传代比例:1:3至1:4(推荐接种密度1×10⁴ cells/cm²)
消化方法:
- 使用0.25%胰酶 - EDTA(含Ca²⁺/Mg²⁺)
- 37℃消化3 - 5分钟,轻拍瓶壁促使细胞脱落后终止
注意事项:
- 避免过度消化(影响细胞膜表面受体完整性)
- 传代后48小时内避免频繁移动培养瓶以促进贴壁
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO及海藻糖保护剂)
细胞密度:冻存浓度1×10⁶ - 3×10⁶ cells/mL
冻存步骤:
- 离心收集细胞后轻柔重悬于冻存液
- 梯度降温程序:4℃ 30分钟 → -20℃ 2小时 → -80℃ 12小时 → 液氮长期储存
复苏验证:
- 复苏后48小时检测细胞活性(台盼蓝染色存活率≥90%)
- 功能验证:神经球形成实验(P8代细胞应保持多向分化潜能)
四、售后服务承诺
重发标准:
1. 运输过程中液氮罐泄露或温度异常(需提供物流温度记录)
2. 到货72小时内证实真菌/细菌污染(需提供污染检测报告)
3. 复苏后细胞贴壁率低于80%(需提供显微成像记录)
4. 细胞标志物鉴定与描述不符(需提供流式检测数据)
不予重发情形:
1. 未使用推荐包被基质导致细胞贴壁失败
2. 自行修改培养基配方引起增殖异常
3. 超代次使用(P15代后)导致的性能下降
4. 未按要求进行定期支原体检测造成的实验干扰
(注:本产品需配合神经干细胞专用培养体系使用,操作前请详细阅读技术手册。)