一、细胞基本属性
- 细胞名称:BV2小鼠小胶质细胞(BV2 Murine Microglia Cells)
- 细胞别称:小胶质细胞系;BV2细胞;脑胶质细胞
- 种属来源:小鼠(Mus musculus)
- 背景特征:源自C57BL/6小鼠脑组织的永生化小胶质细胞系
- 组织来源:脑组织(经SV40病毒转染永生化处理)
- 生长特性:贴壁生长(可呈现活化态悬浮倾向)
- 细胞形态:静息态呈分枝状,活化后转为阿米巴样或球形
- 细胞代数:P5 - P15(推荐使用代数以保证功能稳定性)
- 细胞规格:1×10⁵ cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
- 培养基:DMEM/F12培养基(含10% FBS+1%双抗+0.2% β-巯基乙醇)
- 培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含DMSO及细胞保护剂),液氮长期保存
- 增殖周期:倍增时间约24 - 48小时(与活化状态相关)
- 应用限制:仅限于体外研究,不可用于临床或体内实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:冻存管:37℃水浴解冻后离心去冻存液,预温培养基重悬;培养瓶:酒精消毒表面,静置2小时后更换新鲜培养基
- 传代标准:细胞密度达80% - 90%融合度(通常每2 - 3天传代一次)
- 传代比例:1:3至1:4(建议接种密度3×10⁴ cells/cm²)
- 消化方法:使用0.25% Trypsin - EDTA消化30 - 60秒,轻拍瓶壁辅助脱附
- 活化诱导:可添加100 ng/mL LPS或20 ng/mL IFN - γ刺激炎症反应
- 注意事项:避免频繁换液(维持活化因子浓度),传代后静置24小时再观察
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO+90% FBS)
- 冻存密度:1×10⁶ - 5×10⁶ cells/mL(高密度冻存提升复苏率)
- 冻存程序:梯度降温:4℃ 30分钟→ - 20℃ 2小时→ - 80℃过夜→液氮储存
- 复苏检测:存活率≥90%(台盼蓝法),吞噬功能验证(荧光微球实验)
- 功能质控:TLR4信号通路应答检测(LPS刺激后TNF - α分泌量≥500 pg/mL)
四、售后服务承诺
- 质保范围:
- 运输温度异常导致细胞失活(需提供物流温度记录)
- 到货72小时内检测出支原体污染(需提供电镜或PCR报告)
- 复苏后存活率低于85%(需提供台盼蓝染色视频)
- 细胞STR谱系与数据库记录不符
- 免责条款:
- 未按规范进行预活化直接冻存
- 使用含高浓度细胞因子的培养基导致异常增殖
- 未定期进行支原体检测引发交叉污染
- 超代次使用(P15以上)导致的表型偏移