一、细胞基本属性
- 细胞名称：Beta - TC - 6小鼠胰岛素瘤胰岛Beta细胞
- 细胞别称：胰岛β细胞瘤细胞；胰岛素瘤细胞系；Beta - TC - 6细胞
- 种属来源：小鼠（Mus musculus）
- 年龄性别：特定周龄的雄性小鼠（来源动物经遗传背景验证）
- 组织来源：胰岛β细胞瘤组织
- 生长特性：贴壁生长（需经明胶包被处理）
- 细胞形态：上皮样，单层贴壁呈铺路石样排列
- 细胞代数：P3 - P10（推荐使用代数以保证胰岛素分泌功能）
- 细胞规格：1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含专用冻存液）
- 培养基：DMEM高糖培养基（含15%马血清+2.5%胎牛血清+1%丙酮酸钠）
- 培养条件：气相：5% CO₂ + 95%空气；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含10% DMSO及细胞保护剂），-150℃以下长期保存
- 倍增时间：约48 - 72小时（依据培养条件及传代密度）
- 供应限制：仅限科研使用，不得用于临床或药物开发
二、细胞培养操作指南
- 收货处理
- 冻存管：37℃水浴快速解冻后转移至含5mL预热培养基的离心管，1000rpm离心5分钟，弃上清后重悬接种
- 培养瓶：酒精擦拭外壁后立即置于CO₂培养箱平衡4小时，避免剧烈晃动
- 传代标准：融合度达80% - 90%（通常每2 - 3天传代一次）
- 传代比例：1:2至1:4（建议接种密度为1×10⁴ cells/cm²）
- 消化方法：使用0.25% Trypsin - EDTA溶液（经DPBS稀释配置），37℃消化2 - 3分钟，加入等体积完全培养基终止消化
- 注意事项
- 消化过程中需轻柔吹打避免细胞聚团
- 传代后建议24小时内更换新鲜培养基以稳定细胞状态
- 定期检测胰岛素分泌功能（建议采用葡萄糖刺激实验验证）
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：专用无血清冻存液（含10% DMSO及营养保护剂）
- 细胞密度：冻存浓度建议1×10⁶ - 2×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤
- 消化收集细胞后离心去上清，缓慢加入预冷冻存液重悬
- 分装至冻存管进行程序降温：4℃平衡30分钟，-80℃过夜后转移至液氮长期储存
- 复苏验证
- 复苏后存活率≥85%（台盼蓝染色法确认）
- 功能验证需通过胰岛素ELISA检测（基础分泌量应≥5μIU/10⁴ cells/24h）
四、售后服务承诺
- 重发标准
- 运输过程中温度记录异常导致细胞失活（需提供物流温度监控截图）
- 到货3日内经PCR检测证实支原体污染
- STR鉴定结果与数据库记录不符
- 复苏后活率低于承诺值（附检测视频证据）
- 不予重发情形
- 未按操作指南进行明胶包被导致贴壁失败
- 使用非指定培养基培养超过两代
- 细胞冻存后未经质量检测直接用于实验
- 未在推荐代数范围内使用导致功能异常
