一、细胞基本属性
- 细胞名称：bEnd.3小鼠脑微血管内皮细胞
- 细胞别称：脑微血管内皮细胞系；脑内皮细胞系
- 种属来源：小鼠（Mus musculus）
- 背景特征：源自C57BL/6小鼠脑皮层微血管，经永生化处理
- 组织来源：脑组织微血管段
- 生长特性：贴壁生长（依赖胶原或明胶包被基质）
- 细胞形态：单层铺展后呈梭形或多角形，融合后呈典型铺路石状排列
- 细胞代数：P3 - P10（推荐使用代数保证功能稳定性）
- 细胞规格：1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含无血清冻存液）
- 培养基：DMEM高糖培养基（含10% FBS + 1%内皮细胞生长补充剂）
- 培养条件：气相：5% CO₂+ 95%空气；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含10% DMSO及细胞保护剂），液氮长期保存
- 倍增时间：约24 - 48小时（与培养密度及传代操作相关）
- 应用限制：仅限科学研究，不可用于临床或体内实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理：冻存管：37℃水浴快速解冻，加入预热培养基离心去除冻存液；培养瓶：酒精消毒表面后直接置于37℃培养箱平衡
- 传代标准：细胞融合度达80% - 90%（建议每2 - 3天传代一次）
- 传代比例：1:3至1:6（推荐接种密度3×10^4 cells/cm²）
- 消化方法：使用0.25%胰酶 - EDTA溶液，37℃消化2 - 3分钟，显微镜下确认细胞边缘卷曲后终止
- 关键注意：避免消化过度导致细胞膜损伤，传代后6小时内更换新鲜培养基
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：基础培养基 + 20% FBS + 10% DMSO
- 冻存密度：1×10^6 - 5×10^6 cells/mL
- 冻存程序：细胞悬液分装至冻存管，程序降温：4℃ 30分钟→ - 80℃过夜→液氮长期储存
- 质控验证：复苏存活率≥90%（台盼蓝染色法），屏障功能检测（跨内皮电阻值≥100 Ω·cm²）
四、售后服务承诺
- 重发条款：1. 干冰运输失效（需提供完整温度记录证据）；2. 到货72小时内证实微生物污染（需提供检测报告）；3. 复苏存活率低于承诺标准（需提供染色检测视频）；4. 细胞种属鉴定不符（STR检测报告比对）
- 免责条款：1. 未按推荐方法进行培养基更换或包被处理；2. 使用非指定消化酶导致细胞膜完整性破坏；3. 冻存管未经梯度降温直接投入液氮；4. 细胞培养超过推荐代数仍进行实验
