一、细胞基本属性
细胞名称:BALB/3T3 clone A31小鼠胚胎成纤维细胞
细胞别称:3T3细胞;3T3 - A31;小鼠胚胎成纤维细胞
种属来源:小鼠(Mus musculus)
组织来源:胚胎成纤维细胞(17日龄胚胎)
生长特性:贴壁生长(依赖贴壁基质)
细胞形态:成纤维细胞样,长梭形或多角形,单层贴壁排列
细胞代数:P5 - P15(推荐使用代数,保证增殖活性及稳定性)
细胞规格:1×10⁵ cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
培养基:DMEM高糖培养基(含10% FBS+1%双抗)
培养条件:气相:5% CO₂ +95%空气;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂),-150℃以下长期保存
倍增时间:约18 - 24小时(依赖血清批次及培养密度)
供应限制:仅限科研用途,不可用于临床或生物医学工程产品开发
二、细胞培养操作指南
收货处理:
冻存管:37℃水浴快速解冻,离心后重悬于预热培养基接种
培养瓶:75%酒精表面消毒,静置培养箱4小时恢复贴壁
传代标准:细胞融合度达80% - 90%(约每2 - 3天传代一次)
传代比例:1:4至1:6(推荐接种密度3×10³ cells/cm²)
消化方法:
使用0.25%胰蛋白酶 - EDTA(含Ca²⁺/Mg²⁺)
37℃消化1 - 3分钟,轻拍瓶壁观察细胞脱落即终止
注意事项:
避免过度传代(P15后可能出现增殖减缓)
换液时保留部分原培养基以维持细胞分泌因子
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO+90% FBS)
细胞密度:冻存浓度:1×10⁶ - 5×10⁶ cells/mL
冻存步骤:
消化离心后重悬于冻存液,分装至冻存管
程序降温:4℃ 30分钟→ - 80℃过夜→液氮长期保存
复苏验证:
复苏后48小时检测贴壁率(应≥85%)
功能验证:细胞周期检测(P10代内应维持正常G1/S期比例)
四、售后服务承诺
重发标准:
1. 运输中干冰耗尽导致细胞失活(需提供温度记录证据)
2. 到货72小时内证实支原体污染(需提供检测报告)
3. 复苏后贴壁率低于80%(需提供培养过程影像记录)
4. 细胞STR谱系与ATCC标准数据库不符
不予重发情形:
1. 使用非DMEM培养基或自行调整血清浓度
2. 未按推荐密度传代导致接触抑制失效
3. 未定期进行支原体检测致交叉污染
4. 液氮储存中断导致细胞活性丧失