一、细胞基本属性
细胞名称:B16 - F10+LUC小鼠黑色素瘤细胞(荧光素酶标记株)。别称:黑色素瘤 - LUC细胞、B16荧光素酶报告细胞。种属来源:小鼠(Mus musculus)。品系背景:C57BL/6小鼠黑色素瘤细胞系。组织来源:黑色素瘤组织。荧光标记:稳定表达萤火虫荧光素酶(Luciferase)。生长特性:贴壁生长(无需特殊基质)。细胞形态:不规则梭形或多角形,可形成致密克隆。细胞代数:建议使用P5 - P10代(确保荧光素酶活性稳定)。细胞规格:1×10⁶ cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含血清冻存液)。培养基:DMEM高糖培养基(含10% FBS+1%双抗)。培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%。冻存条件:含血清冻存液(含10% DMSO),液氮长期保存。检测指标:荧光素酶活性≥1×10⁸ RLU/mg(通过活体成像系统验证)。应用范围:肿瘤转移机制研究、药物筛选、活体生物发光成像。供应限制:仅限体外实验及动物模型构建。
二、细胞培养操作指南
收货处理:冻存管:37℃水浴解冻,离心去冻存液后重悬于预热培养基;培养瓶:酒精擦拭表面后直接置于CO₂培养箱。传代标准:细胞融合度达80% - 90%(建议每2 - 3天传代)。传代比例:1:4至1:6(推荐密度1×10⁴ cells/cm²)。消化方法:使用0.25%胰酶 - EDTA,室温消化3 - 5分钟,轻拍瓶壁促使细胞脱落。注意事项:避免长时间消化(影响荧光素酶表达稳定性);传代后48小时内避免药物处理。
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方:含血清冻存液(含10% DMSO+20% FBS)。细胞密度:冻存浓度5×10⁵ - 1×10⁶ cells/mL。冻存步骤:离心后重悬于冻存液;程序降温:4℃ 30分钟 → - 80℃过夜 → 液氮储存。质量验证:复苏存活率≥90%(台盼蓝染色法);荧光素酶活性检测:与冻存前对比下降不超过10%。
四、售后服务承诺
重发标准:1. 细胞复苏后活性<85%(需提供24小时内检测视频);2. 支原体污染(需提供第三方检测报告);3. 荧光素酶活性缺失(需提供活体成像原始数据);4. 细胞种属鉴定不符(STR比对结果)。免责情形:1. 未使用指定培养基导致荧光素酶表达衰减;2. 活体成像时未注射荧光素底物导致检测失败;3. 反复冻融超过2次造成细胞损伤;4. 未按规范进行抗生素筛选导致标记丢失(注:本产品需配合D - 荧光素钾盐使用,推荐工作浓度150mg/kg,注射后10分钟进行活体成像检测)