一、细胞基本属性
- 细胞名称：B16 - F10小鼠黑色素瘤细胞
- 细胞别称：B16F10；鼠源黑色素瘤细胞；小鼠黑色素瘤高转移亚系
- 种属来源：小鼠（Mus musculus）
- 背景特征：C57BL/6小鼠皮肤黑色素瘤自发转移模型来源
- 组织来源：皮肤黑色素瘤组织（经多次肺转移筛选获得高转移亚系）
- 生长特性：贴壁生长（偶见悬浮细胞需及时移除）
- 细胞形态：不规则梭形或多边形，核质比高，胞质内可见黑色素颗粒
- 细胞代数：P5 - P15（建议控制传代次数以维持致瘤性）
- 细胞规格：1×10^6 cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含完全冻存液）
- 培养基：高糖DMEM（含10% FBS + 2mM L -谷氨酰胺+1mM丙酮酸钠）
- 培养条件：气相：5% CO₂；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：含血清冻存液（含10% DMSO），-150℃以下长期保存
- 倍增时间：~18 - 24小时（与培养基批次及接种密度相关）
- 供应限制：仅限科研用途，不可用于临床或活体移植实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理：冻存管：37℃水浴快速解冻，离心后重悬于预热培养基；培养瓶：静置4小时后全量换液，移除运输中死亡细胞
- 传代标准：细胞融合度达80% - 90%（建议每2 - 3天传代一次）
- 传代比例：1:4至1:6（推荐接种密度1×10^4 cells/cm²）
- 消化方法：使用0.25%胰蛋白酶 - EDTA（含Ca²⁺/Mg²⁺），37℃消化2 - 3分钟，轻拍瓶壁使细胞脱落
- 注意事项：避免消化时间过长（易导致黑色素颗粒泄漏）；传代后需48小时内观察贴壁情况，及时补足培养基
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：完全培养基+10% DMSO（现配现用）
- 细胞密度：冻存浓度：5×10^6 - 1×10^7 cells/mL
- 冻存步骤：对数生长期细胞消化离心后重悬于冻存液；程序降温：4℃ 30min → -80℃ 24h → 液氮长期储存
- 复苏验证：复苏后12小时贴壁率需≥85%（相差显微镜观察）；功能验证：软琼脂克隆形成实验（P10代细胞应保持致瘤特性）
四、售后服务承诺
- 重发标准：运输温度记录异常导致细胞团块化（需提供温度记录截图）；72小时内证实真菌/细菌污染（需提供染色检测图像）；复苏后贴壁率低于80%（需提供接种后24小时显微照片）；STR分型与数据库不一致
- 不予重发情形：未按推荐密度接种导致细胞过度堆积；使用含β - 巯基乙醇培养基影响黑色素合成；长期传代后自发突变导致的表型改变；未定期进行支原体检测引发的交叉污染
