一、细胞基本属性
- 细胞名称:ATDC5小鼠胚胎瘤细胞
- 细胞别称:ATDC5细胞;小鼠胚胎软骨瘤细胞
- 种属来源:小鼠(Mus musculus)
- 组织来源:胚胎瘤组织(源自AT805腺癌自发分化模型)
- 生长特性:贴壁生长(依赖胶原蛋白涂层)
- 细胞形态:长梭形或多角形,成纤维样贴壁生长
- 细胞代数:P5 - P15(建议使用前10代以保证分化潜能)
- 细胞规格:1×10⁶ cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
- 培养基:DMEM/F12培养基(含5% FBS + 10μg/mL胰岛素+10μg/mL转铁蛋白+3×10⁻⁸M亚硒酸钠)
- 培养条件:气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及胎牛血清),-150℃以下长期保存
- 倍增时间:约24 - 36小时(依赖胰岛素浓度及细胞密度)
- 供应限制:仅限科研用途,不可用于临床或体内实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,离心后重悬于预热培养基
- 培养瓶:75%酒精表面消毒,静置培养箱4小时后再观察
- 传代标准:细胞融合度达80% - 90%(通常每2 - 3天传代一次)
- 传代比例:1:3至1:6(推荐接种密度1×10⁴ cells/cm²)
- 消化方法:
- 使用0.25% Trypsin - EDTA(含0.02% EDTA)
- 37℃消化3 - 5分钟,轻拍瓶壁促使细胞脱落
- 注意事项:
- 需预包被0.1%明胶以增强贴壁性
- 分化诱导时需更换为含抗坏血酸及地塞米松的分化培养基
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:基础培养基+20% FBS + 10% DMSO
- 细胞密度:冻存浓度:5×10⁶ - 1×10⁷ cells/mL
- 冻存步骤:
- 离心后缓慢滴加冻存液重悬
- 程序降温:4℃ 30min → -80℃ 24h → 转入液氮
- 复苏验证:
- 复苏后贴壁率需≥85%(48小时观察)
- 分化能力验证:21天内需形成软骨结节(阿辛蓝染色阳性)
四、售后服务承诺
- 重发标准:
- 物流温度记录异常导致细胞失活
- 到货72小时内证实微生物污染
- 细胞存活率低于85%(需提供台盼蓝染色证据)
- 种属鉴定结果不符
- 不予重发情形:
- 未使用明胶包被导致贴壁失败
- 擅自更改胰岛素浓度影响增殖
- 超过推荐代数导致分化能力丧失
- 未按说明书进行软骨诱导验证