一、细胞基本属性
- 细胞名称：Ana - 1小鼠巨噬细胞
- 细胞别称：Ana - 1细胞；小鼠巨噬细胞系
- 种属来源：小鼠（Mus musculus）
- 背景品系：BALB/c小鼠
- 组织来源：骨髓源性巨噬细胞（经病毒转化建系）
- 生长特性：贴壁生长（可形成伪足及吞噬突触）
- 细胞形态：不规则多形性，活化后呈现典型梭形或星形
- 细胞代数：P5 - P15（推荐使用代数以保证功能稳定性）
- 细胞规格：1×10^6 cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含无血清冻存液）
- 培养基：RPMI - 1640（含10% FBS+1%双抗+10ng/mL M - CSF）
- 培养条件：气相：5% CO₂；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含10% DMSO及细胞保护剂），-150℃以下长期保存
- 功能特性：具备吞噬功能、炎症因子分泌能力及抗原呈递特性
- 供应限制：仅限科研用途，不可用于临床或活体实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，离心后重悬于预热培养基
- 贴壁细胞：酒精擦拭瓶身后直接置于培养箱，24小时后首次换液
- 传代标准：细胞融合度达80% - 90%（活化后增殖速度加快）
- 传代比例：1:3至1:5（推荐接种密度1×10^4 cells/cm²）
- 消化方法
- 使用0.25%胰酶 - EDTA（含Ca²⁺/Mg²⁺）
- 37℃消化3 - 5分钟，轻拍瓶壁促使细胞脱落
- 注意事项
- 避免反复吹打（巨噬细胞易受机械损伤）
- 传代后48小时内避免刺激实验
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO+20% FBS）
- 细胞密度：冻存浓度：5×10^6 - 1×10^7 cells/mL
- 冻存步骤
- 离心收集活化状态细胞，重悬于冻存液
- 程序降温：4℃ 30min → -80℃过夜 → 液氮长期保存
- 复苏验证
- 复苏后48小时检测细胞活性（台盼蓝存活率≥90%）
- 功能验证：FITC - dextran吞噬实验（P8代细胞吞噬率应＞60%）
四、售后服务承诺
- 重发标准
- 运输过程温度异常导致细胞死亡（需提供物流温度记录）
- 到货72小时内证实支原体污染（需提供检测报告）
- 细胞复苏后贴壁率低于80%（需提供明场显微照片）
- 种属鉴定结果与描述不符
- 不予重发情形
- 未按要求使用含M - CSF的专用培养基
- 擅自使用LPS等刺激物导致细胞过度活化
- 培养环境CO₂浓度超过8%
- 未定期进行支原体检测引发交叉污染
