4T1+luc小鼠乳腺癌细胞荧光素酶标记

小鼠细胞系

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XM-X00041×10^6小鼠细胞系3000


一、细胞基本属性

- 细胞名称:4T1+luc小鼠乳腺癌细胞(荧光素酶标记)

- 细胞别称:4T1 - luc细胞;荧光素酶标记小鼠乳腺癌细胞

- 种属来源:小鼠(Mus musculus)

- 组织来源:乳腺组织(原位乳腺癌模型)

- 生长特性:贴壁生长(依赖培养基营养成分)

- 细胞形态:不规则多边形,贴壁后呈铺路石样排列

- 荧光标记特性:稳定表达荧光素酶(luciferase),适用于活体成像及体外生物发光检测

- 细胞代数:P5 - P15(保证荧光素酶表达稳定性)

- 细胞规格:1×10^6 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含血清冻存液)

- 培养基:RPMI 1640培养基(含10% FBS + 1%双抗+0.2 mg/mL G418维持筛选)

- 培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%

- 冻存条件:含血清冻存液(含10% DMSO), - 150℃以下长期保存

- 增殖特性:倍增时间约18 - 24小时(高侵袭性,适合肿瘤模型构建)

- 应用限制:仅限科研用途,不可用于临床或人体实验


二、细胞培养操作指南

- 收货处理

    - 冻存管:37℃水浴快速解冻,离心后重悬于预热培养基。

    - 培养瓶:酒精消毒表面,静置培养箱4小时稳定。

- 传代标准:细胞融合度达80% - 90%(建议每2 - 3天传代一次)

- 传代比例:1:5至1:10(推荐接种密度1×10^4 cells/cm²)

- 消化方法

    - 使用0.25%胰酶 - EDTA(含酚红指示剂)。

    - 37℃消化1 - 3分钟,轻柔拍打至细胞脱壁后终止。

- 注意事项

    - 定期检测荧光素酶活性(避免长期传代导致标记丢失)。

    - 传代后48小时内避免抗生素筛选压力。


三、细胞冻存操作规范

- 冻存液配方:含血清冻存液(含10% DMSO及20% FBS)

- 细胞密度:冻存浓度:5×10^6 - 1×10^7 cells/mL

- 冻存步骤

    - 消化离心后重悬于冻存液,分装至冻存管。

    - 程序降温:4℃ 30分钟→ - 80℃过夜→液氮长期保存。

- 复苏验证

    - 复苏后48小时检测生物发光活性(IVIS系统验证)。

    - 细胞形态观察:维持典型乳腺癌细胞特征。


四、售后服务承诺

- 重发标准

    - 运输过程中干冰耗尽导致细胞失活(需提供物流温度记录)。

    - 7天内证实荧光素酶表达缺失(需提供体外成像数据)。

    - 细胞污染(需提供第三方微生物检测报告)。

    - 活体成像信号强度与说明书不符(需提供原始数据)。

- 不予重发情形

    - 未使用G418维持筛选导致标记丢失。

    - 解冻后未按规范离心去除冻存液。

    - 活体成像前未注射荧光素底物(D - luciferin)。

    - 超过推荐代数(P15)仍要求功能性质控。