一、细胞基本属性
- 细胞名称:4T1+luc小鼠乳腺癌细胞(荧光素酶标记)
- 细胞别称:4T1 - luc细胞;荧光素酶标记小鼠乳腺癌细胞
- 种属来源:小鼠(Mus musculus)
- 组织来源:乳腺组织(原位乳腺癌模型)
- 生长特性:贴壁生长(依赖培养基营养成分)
- 细胞形态:不规则多边形,贴壁后呈铺路石样排列
- 荧光标记特性:稳定表达荧光素酶(luciferase),适用于活体成像及体外生物发光检测
- 细胞代数:P5 - P15(保证荧光素酶表达稳定性)
- 细胞规格:1×10^6 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含血清冻存液)
- 培养基:RPMI 1640培养基(含10% FBS + 1%双抗+0.2 mg/mL G418维持筛选)
- 培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:含血清冻存液(含10% DMSO), - 150℃以下长期保存
- 增殖特性:倍增时间约18 - 24小时(高侵袭性,适合肿瘤模型构建)
- 应用限制:仅限科研用途,不可用于临床或人体实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,离心后重悬于预热培养基。
- 培养瓶:酒精消毒表面,静置培养箱4小时稳定。
- 传代标准:细胞融合度达80% - 90%(建议每2 - 3天传代一次)
- 传代比例:1:5至1:10(推荐接种密度1×10^4 cells/cm²)
- 消化方法
- 使用0.25%胰酶 - EDTA(含酚红指示剂)。
- 37℃消化1 - 3分钟,轻柔拍打至细胞脱壁后终止。
- 注意事项
- 定期检测荧光素酶活性(避免长期传代导致标记丢失)。
- 传代后48小时内避免抗生素筛选压力。
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:含血清冻存液(含10% DMSO及20% FBS)
- 细胞密度:冻存浓度:5×10^6 - 1×10^7 cells/mL
- 冻存步骤
- 消化离心后重悬于冻存液,分装至冻存管。
- 程序降温:4℃ 30分钟→ - 80℃过夜→液氮长期保存。
- 复苏验证
- 复苏后48小时检测生物发光活性(IVIS系统验证)。
- 细胞形态观察:维持典型乳腺癌细胞特征。
四、售后服务承诺
- 重发标准
- 运输过程中干冰耗尽导致细胞失活(需提供物流温度记录)。
- 7天内证实荧光素酶表达缺失(需提供体外成像数据)。
- 细胞污染(需提供第三方微生物检测报告)。
- 活体成像信号强度与说明书不符(需提供原始数据)。
- 不予重发情形
- 未使用G418维持筛选导致标记丢失。
- 解冻后未按规范离心去除冻存液。
- 活体成像前未注射荧光素底物(D - luciferin)。
- 超过推荐代数(P15)仍要求功能性质控。