一、细胞基本属性
- 细胞名称：3T3 - L1小鼠胚胎成纤维细胞
- 细胞别称：3T3 - L1细胞；小鼠前脂肪细胞系
- 种属来源：小鼠（Mus musculus）
- 组织来源：胚胎成纤维细胞（Swiss albino小鼠）
- 生长特性：贴壁生长（依赖细胞贴壁基质）
- 细胞形态：成纤维样，增殖期呈长梭形，汇合后呈铺路石状排列
- 细胞代数：P3 - P8（确保分化潜能稳定）
- 细胞规格：1×10⁵ cells/T25培养瓶 或1mL冻存管（含无血清冻存液）
- 培养基：高糖DMEM（含10%胎牛血清+1%青霉素/链霉素）
- 培养条件：气相：5% CO₂+95%空气；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含10% DMSO及细胞保护剂），-150℃以下长期保存
- 倍增时间：约24 - 48小时（依赖血清批次与培养密度）
- 供应限制：仅限科研用途，不可用于临床或动物实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理：
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，加5mL预热培养基混匀离心（1000rpm，3分钟），弃冻存液后重悬接种。
- 培养瓶：75%酒精表面消毒，静置培养箱1小时平衡后更换新鲜培养基。
- 传代标准：细胞融合度达80% - 90%（通常每2 - 3天传代一次）。
- 传代比例：1:3至1:4（推荐接种密度1×10⁴ cells/cm²）。
- 消化方法：
- 使用0.25% Trypsin - EDTA（含0.02% EDTA）。
- 37℃消化1 - 2分钟，轻拍瓶壁使细胞脱落，立即加入含血清培养基终止消化。
- 注意事项：
- 避免消化过度（影响细胞膜完整性）。
- 传代后6小时内避免移动培养瓶，确保贴壁稳定性。
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO+90%胎牛血清）。
- 细胞密度：冻存浓度：1×10⁶-5×10⁶ cells/mL。
- 冻存步骤：
- 消化细胞后离心，重悬于预冷冻存液。
- 程序降温：4℃ 30分钟 → -80℃过夜 → 转入液氮长期储存。
- 复苏验证：
- 复苏后存活率≥90%（台盼蓝染色法）。
- 功能验证：诱导分化后油红O染色确认脂滴积累（P5代细胞应具备分化潜力）。
四、售后服务承诺
- 重发标准：
- 运输过程中温度记录异常导致细胞死亡（需提供物流温度证明）。
- 收到后48小时内证实微生物污染（需提供检测报告）。
- 复苏存活率低于85%（需提供染色结果及操作视频）。
- 细胞STR图谱与数据库不匹配。
- 不予重发情形：
- 客户未按规范进行预培养或直接冻存。
- 使用非高糖DMEM或低血清培养基导致增殖异常。
- 未按时传代导致细胞老化或分化能力丧失。
- 自行修改培养条件（如缺氧处理）引发的功能异常。
