一、细胞基本属性
细胞名称
人脑血管周细胞(Human Cerebral Vascular Pericytes)
细胞别称
HCVP;脑血管周围细胞;脑微血管周细胞
种属来源
人(Homo sapiens)
年龄性别
健康成人(性别不限,供体筛选无神经系统疾病史)
组织来源
脑组织微血管段
生长特性
贴壁生长(需预包被胶原或纤维连接蛋白基质)
细胞形态
长梭形或星状分支结构,接触抑制后呈紧密网状排列
细胞代数
P3 - P8(维持功能性标志物表达及收缩特性)
细胞规格
1×10⁵ cells/T25培养瓶 或 1mL冻存管(无血清冻存体系)
培养基
Pericyte Medium(含5% FBS + PDGF - BB及基础生长因子)
培养条件
气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件
程序降温冻存液(含10% DMSO及血清替代物),液氮长期保存
倍增时间
~72 - 96小时(受细胞密度及基质微环境影响)
供应限制
仅限体外研究使用,不可用于临床或体内移植
二、细胞培养操作指南
收货处理
· 冻存管:37℃水浴快速解冻,离心去除冻存液后重悬于预热培养基
· 培养瓶:酒精消毒外表面,静置4小时待温度平衡后换液
传代标准
细胞融合度达90% - 95%(建议每5 - 7天传代)
传代比例
1:2至1:4(推荐接种密度3×10³ cells/cm²)
消化方法
· 使用0.25% Trypsin - EDTA(含0.5mM EDTA)
· 37℃消化3 - 5分钟,轻拍瓶壁促使细胞脱离
注意事项
· 消化终止需立即加入含血清培养基
· 传代后48小时内避免频繁观察以防机械扰动
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方
无动物源冻存液(含10% DMSO + 海藻糖保护剂)
细胞密度
冻存浓度:5×10⁵ - 1×10⁶ cells/mL
冻存步骤
· 离心收集细胞,逐滴加入冻存液混匀
· 程序降温:4℃ 30min → -80℃过夜 → 液氮储存
复苏验证
· 复苏后48小时检测α - SMA阳性率(标准≥90%)
· 功能验证:胶原收缩实验(P5代细胞应维持收缩响应能力)
四、售后服务承诺
重发标准
1. 运输温度异常致细胞死亡(需提供物流温度记录)
2. 7天内证实支原体/真菌污染(需第三方检测报告)
3. 标志物表达缺失(α - SMA/NG2免疫荧光验证)
4. 细胞活率低于85%(流式细胞术检测)
不予重发情形
1. 超时复苏(收样后>48小时未处理)
2. 自行更改培养基导致表型丢失
3. 未使用推荐基质包被培养器皿
4. 未定期进行核型分析导致遗传漂变