一、细胞基本属性
- 细胞名称：人脑微血管内皮细胞（Human Brain Microvascular Endothelial Cells）
- 细胞别称：HBMEC；脑微血管内皮细胞；脑血管内皮细胞
- 种属来源：人（Homo sapiens）
- 年龄性别：健康成人（性别不限，供体筛选无神经系统疾病史）
- 组织来源：脑组织微血管段
- 生长特性：贴壁生长（依赖胶原蛋白或纤维连接蛋白包被）
- 细胞形态：单层铺路石样排列，接触抑制后呈紧密镶嵌的多边形
- 细胞代数：P3 - P8（维持血脑屏障特性与低传代变异风险）
- 细胞规格：1×10^5 cells/T25培养瓶 或 1mL冻存管（含无血清冻存液）
- 培养基：Endothelial Cell Medium（含5% FBS + 内皮细胞特异性生长因子）
- 培养条件：气相：5% CO₂ + 95%空气；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含10% DMSO及细胞保护剂），液氮长期保存
- 倍增时间：约60 - 72小时（依赖基质包被与生长因子浓度）
- 供应限制：仅供科学研究，禁止临床治疗、药物生产或动物移植
二、细胞培养操作指南
- 收货处理
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，离心后重悬于预温培养基
- 培养瓶：酒精消毒表面，静置培养箱4小时恢复代谢
- 传代标准：融合度达80% - 90%（血脑屏障功能相关实验建议使用P4 - P6代）
- 传代比例：1:2至1:3（推荐密度4×10³ cells/cm²以维持紧密连接）
- 消化方法：使用0.25%胰酶 - EDTA溶液，37℃消化2 - 3分钟，轻柔吹打终止消化，离心后更换新鲜培养基
- 注意事项
- 避免频繁换液（维持细胞旁分泌因子浓度）
- 传代后48小时内避免跨膜电阻检测等屏障功能实验
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO及海藻糖）
- 细胞密度：冻存浓度：1.5×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤：离心收集细胞，重悬于冻存液后分装至冻存管，程序降温：4℃ 30分钟 → -80℃ 过夜 → 液氮长期储存
- 复苏验证
- 复苏存活率≥90%（台盼蓝染色法）
- 功能验证：免疫荧光检测紧密连接蛋白ZO - 1表达
四、售后服务承诺
- 重发标准
1. 运输过程中干冰耗尽导致细胞失活（需提供物流温度记录）
2. 到货72小时内证实微生物污染（需提供第三方检测报告）
3. 细胞STR分型与数据库不匹配
4. 复苏后存活率低于85%（需提供染色图片及计数数据）
- 不予重发情形
1. 未按说明书进行基质包被导致细胞贴壁失败
2. 使用非配套培养基或血清引发功能异常
3. 实验操作污染（如未在生物安全柜中处理）
4. 液氮保存设备故障导致的反复冻融
