一、细胞基本属性
细胞名称:人神经干细胞(Human Neural Stem Cells)
细胞别称:NSCs;神经前体细胞;神经祖细胞
种属来源:人(Homo sapiens)
年龄性别:健康成人(性别不限,供体筛选无神经系统疾病史)
组织来源:脑组织特定区域(如海马体或皮层)
生长特性:悬浮成球或贴壁生长(依赖培养基成分及基质包被)
细胞形态:悬浮培养呈球状克隆,贴壁培养呈放射状或多极延伸
细胞代数:P3 - P8(维持干性标记物表达及分化潜能)
细胞规格:1×10^5 cells/T25培养瓶 或 1mL冻存管(含无血清冻存液)
培养基:神经干细胞专用培养基(含EGF、bFGF及B27添加剂)
培养条件:气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件:无血清冻存液(含DMSO及细胞保护剂),-150℃以下长期保存
倍增时间:~72 - 96小时(依赖培养条件及克隆密度)
供应限制:仅限科研用途,不可用于临床治疗或药物开发
二、细胞培养操作指南
收货处理:
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,离心去除冻存液后重悬于预温培养基
- 培养瓶:75%酒精表面消毒,静置于37℃培养箱恢复4小时
传代标准:悬浮球直径达150 - 200微米或贴壁细胞融合度达80%
传代比例:悬浮培养按1:3分瓶,贴壁培养按1:2至1:3机械分离
消化方法:
- 悬浮球:轻柔吹打或使用Accutase解离为单细胞
- 贴壁细胞:0.25% Trypsin - EDTA消化3 - 5分钟
注意事项:
- 避免长时间消化损伤干性标记物
- 传代后48小时内避免换液以维持生长因子浓度
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO及糖原保护剂)
细胞密度:冻存浓度:5×10⁵ - 1×10⁶ cells/mL
冻存步骤:
- 收集细胞悬液离心,重悬于冻存液分装至冻存管
- 程序降温:4℃ 30分钟 → -80℃ 24小时 → 液氮长期保存
复苏验证:
- 复苏后48小时检测细胞活性(台盼蓝染色存活率≥85%)
- 功能验证:Nestin免疫荧光染色及多向分化能力检测
四、售后服务承诺
重发标准:
1. 运输过程温度异常导致细胞失活(需提供物流温度记录)
2. 到货7日内证实支原体或真菌污染(需第三方检测报告)
3. 细胞复苏后干性标记物表达阴性(需流式检测数据)
不予重发情形:
1. 未使用指定培养基或生长因子添加剂
2. 自行修改培养条件导致细胞分化或死亡
3. 冻存管反复冻融或超期保存
4. 未按操作指南进行细胞传代与扩增
(注:以上内容为通用模板,具体参数需根据实验室实际培养体系调整)