一、细胞基本属性
细胞名称
人羊水干细胞（Human Amniotic Fluid Stem Cells）
细胞别称
hAFSC；羊水间充质干细胞；羊水来源多能干细胞
种属来源
人（Homo sapiens）
年龄性别
胎儿（孕中期羊水穿刺获取，供体信息经伦理审查及匿名化处理）
组织来源
临床合规采集的羊水样本（无菌条件下离心分离）
生长特性
贴壁生长（需纤维连接蛋白或胶原包被培养器皿）
细胞形态
长梭形或纺锤状，融合后呈平行或漩涡状排列
细胞代数
P3 - P10（维持干细胞特性及分化潜能的关键代次）
细胞规格
5×10⁵ cells/T25培养瓶 或 1.2mL冻存管（含无血清冻存液）
培养基
专用间充质干细胞培养基（含10% FBS + 碱性成纤维细胞生长因子）
培养条件
气相：5% CO₂；温度：37℃；湿度：95%
冻存条件
无动物源冻存液（含5% DMSO及海藻糖），液氮气相长期保存
倍增时间
约48 - 60小时（受细胞密度及传代频率影响）
供应限制
仅用于非临床研究，禁止用于人体移植或基因编辑实验
二、细胞培养操作指南
收货处理
• 冻存管：37℃水浴解冻后离心去冻存液，重悬于预热培养基
• 培养瓶：表面消毒后直接置于CO₂培养箱静置4小时
传代标准
细胞密度达80% - 90%融合（通常每5 - 7天传代一次）
传代比例
1:3至1:4（建议接种密度1×10⁴ cells/cm²）
消化方法
• 使用0.25%胰蛋白酶 - EDTA溶液
• 37℃消化3 - 5分钟，轻拍瓶壁促使细胞脱落
注意事项
• 避免消化过度（影响细胞表面标志物表达）
• 首次传代后需48小时内更换培养基以去除碎片
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方
无血清冻存液（含5% DMSO + 10%右旋糖酐）
细胞密度
冻存浓度：1×10⁶ - 2×10⁶ cells/mL
冻存步骤
• 细胞悬液与冻存液按1:1混合
• 程序降温：4℃ 30分钟 → -80℃ 24小时 → 液氮储存
复苏验证
• 复苏后48小时检测活率（台盼蓝染色≥90%）
• 功能验证：三系分化潜能检测（成骨/成脂/成软骨诱导实验）
四、售后服务承诺
重发标准
1. 运输温度记录异常导致细胞失活（需提供温度追踪报告）
2. 到货72小时内证实微生物污染（需提供第三方检测证明）
3. 细胞标志物鉴定不符合国际标准（CD90 + /CD73 + /CD45 - ）
4. 细胞活率低于承诺值（流式细胞术复检确认）
不予重发情形
1. 未使用指定包被试剂导致贴壁失败
2. 自行修改培养基配方引发细胞分化
3. 液氮储存设备故障导致的反复冻融
4. 未按要求进行细胞核型分析即用于实验
