一、细胞基本属性
- 细胞名称:人雪旺细胞(Human Schwann Cells)
- 细胞别称:雪旺氏细胞;神经胶质细胞;外周神经鞘细胞
- 种属来源:人(Homo sapiens)
- 年龄性别:健康成人(性别不限,供体无神经系统疾病史)
- 组织来源:周围神经组织(如坐骨神经或臂丛神经)
- 生长特性:贴壁生长(需包被多聚赖氨酸或层粘连蛋白基质)
- 细胞形态:典型梭形或双极形态,胞体细长且突起明显
- 细胞代数:P3 - P6(确保髓鞘形成能力及功能稳定性)
- 细胞规格:5×10⁵ cells/T25培养瓶 或 1mL冻存管(含无血清冻存液)
- 培养基:雪旺细胞专用培养基(含10% FBS + 神经生长因子 + Heregulin添加剂)
- 培养条件:气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂),-150℃以下长期保存
- 倍增时间:约72 - 96小时(依赖生长因子浓度及基质包被条件)
- 供应限制:仅限科学研究使用,不可用于临床治疗或体内移植
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:冻存管:37℃水浴快速解冻,离心后重悬于预热培养基;培养瓶:酒精消毒后静置于培养箱内平衡2小时。
- 传代标准:细胞融合度达80% - 90%时传代(通常每周传代一次)。
- 传代比例:建议1:2分瓶(接种密度不低于1×10⁴ cells/cm²)。
- 消化方法:使用0.25% Trypsin - EDTA消化3 - 5分钟,镜下观察细胞收缩后立即加入含血清培养基终止。
- 注意事项:避免机械吹打过度损伤细胞;传代后48小时内避免换液以维持细胞黏附。
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO及海藻糖保护剂)。
- 冻存密度:推荐1×10⁶ - 2×10⁶ cells/mL。
- 冻存步骤:细胞离心后重悬于冻存液,分装至冻存管,程序降温:4℃ 30分钟 → -20℃ 2小时 → -80℃过夜 → 液氮长期保存。
- 复苏验证:复苏后存活率≥85%(台盼蓝染色法);功能验证需通过S100β免疫荧光染色确认特异性标志物表达。
四、售后服务承诺
- 重发标准:
1. 运输过程中温度记录异常导致细胞失活(需提供物流温度监控报告);
2. 到货72小时内经PCR检测证实支原体污染;
3. 细胞STR鉴定与备案信息不符;
4. 复苏后存活率低于80%(需提供台盼蓝检测影像)。
- 不予重发情形:
1. 未按规范使用非推荐培养基或包被基质;
2. 细胞解冻后超72小时未进行贴壁培养;
3. 自行反复冻融导致细胞损伤;
4. 未进行预实验验证直接开展动物移植研究。