一、细胞基本属性
- 细胞名称：人脐血间充质干细胞（Human Umbilical Cord Blood Mesenchymal Stem Cells）
- 细胞别称：HUCB - MSC；脐血间充质干细胞；脐血MSC
- 种属来源：人（Homo sapiens）
- 年龄性别：新生儿（性别不限，供体经感染及遗传病筛查）
- 组织来源：健康足月新生儿脐带血
- 生长特性：贴壁生长（依赖特定细胞因子及基质支持）
- 细胞形态：长梭形或成纤维样，单层贴壁呈漩涡状排列
- 细胞代数：P3 - P8（维持多向分化潜能及基因组稳定性）
- 细胞规格：5×10⁵ cells/T25培养瓶 或 1mL冻存管（含血清冻存液）
- 培养基：MSC专用培养基（含10% FBS + 基础生长因子组合）
- 培养条件：气相：5% CO₂ + 95%空气；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：血清冻存液（含DMSO及营养保护剂），-150℃以下长期保存
- 增殖能力：群体倍增时间约24 - 48小时（依赖接种密度及传代条件）
- 供应限制：仅用于体外研究，不可应用于临床治疗或体内实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，离心去除冻存液后重悬于预热培养基
- 培养瓶：酒精消毒表面，静置于培养箱2小时平衡温湿度
- 传代标准：细胞融合度达80% - 90%（建议每5 - 7天传代一次）
- 传代比例：1:3至1:4（推荐初始接种密度1×10⁴ cells/cm²）
- 消化方法
- 使用0.25% Trypsin - EDTA（含Ca²⁺/Mg²⁺平衡液）
- 37℃消化2 - 3分钟，轻拍瓶壁促使细胞脱落
- 注意事项
- 终止消化时需加入含血清培养基中和酶活性
- 首次换液建议在传代后48小时进行
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：含10% DMSO及20% FBS的专用冻存液
- 细胞密度：冻存浓度：1×10⁶ - 5×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤
- 离心收集细胞后轻柔重悬于冻存液
- 程序降温：4℃ 30min → -20℃ 2h → -80℃过夜 → 液氮长期保存
- 复苏验证
- 复苏后24小时存活率≥90%（台盼蓝染色法）
- 功能验证：三系分化能力检测（成骨/成脂/成软骨诱导实验）
四、售后服务承诺
- 重发标准
1. 干冰运输异常导致细胞失活（需提供温度记录证明）
2. 到货72小时内检出微生物污染（需提供检测报告）
3. 细胞表面标志物CD73/CD90/CD105阳性率＜95%
4. 细胞分化能力未达技术参数标准
- 不予重发情形
1. 未按规范进行复苏前培养基预热
2. 使用非推荐消化酶导致细胞膜损伤
3. 超代次（P8以上）使用导致功能衰退
4. 未执行无菌操作引发交叉污染
