一、细胞基本属性
- 细胞名称:人脐血树突状细胞(Human Umbilical Cord Blood Dendritic Cells)
- 细胞别称:脐血DC细胞、脐带血来源树突细胞、DC细胞
- 种属来源:人(Homo sapiens)
- 供体信息:健康足月新生儿脐带血(经血清学检测排除传染性疾病)
- 细胞来源:脐带血单核细胞经细胞因子诱导分化
- 生长特性:悬浮/半贴壁混合生长(依赖细胞因子梯度)
- 细胞形态:典型树突状突起,活化后表面褶皱增多
- 细胞代数:P2 - P6(建议实验使用前3代以保证抗原呈递功能)
- 细胞规格:5×10^5 cells/冻存管(含无血清冻存液)或T25培养瓶直接培养
- 培养基:RPMI 1640 + 10% FBS + GM - CSF(50ng/mL)+ IL - 4(20ng/mL)
- 培养条件:5% CO₂环境,37℃恒温培养,每48小时半量换液
- 冻存条件:程序降温冻存液(含5% DMSO + 50% FBS),液氮长期保存
- 关键功能:强抗原呈递能力,CD11c+CD83+双阳性率≥85%
- 应用限制:仅供体外研究使用,不可用于临床治疗
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:
- 冻存细胞立即37℃水浴复苏,预冷培养基稀释离心
- 贴壁细胞保留原培养基静置培养4小时后首次换液
- 传代时机:细胞集落密度达80%或培养满5天时传代
- 传代方法:
- 轻柔吹打收集悬浮细胞,贴壁细胞采用细胞刮机械分离
- 按1:2比例接种于预铺纤维连接蛋白的培养器皿
- 分化诱导:
- 第5天加入TNF - α(20ng/mL)促进成熟分化
- 流式检测CD86/CD80表达确认成熟度
三、细胞冻存操作规范
- 最佳冻存期:分化诱导后第7 - 8天(成熟态DC)
- 冻存密度:1×10^6 cells/mL(冻存液体积不超过1.5mL/管)
- 梯度降温:
- 4℃平衡30分钟
- -80℃过夜后转入气相液氮
- 质量控制:
- 复苏存活率≥80%(台盼蓝检测)
- 吞噬功能验证:FITC - dextran摄取实验
- 刺激指数:混合淋巴细胞反应≥3倍增殖
四、售后服务承诺
- 到货48小时内反馈异常情况
- 提供完整分化培养方案及T细胞共孵育protocol
- 免费提供细胞鉴定参考数据(流式图 + 显微照片)