一、细胞基本属性
细胞名称
人脐带间充质干细胞(Human Umbilical Cord Mesenchymal Stem Cells)
细胞别称
hUC - MSCs;脐带间充质干细胞;脐带源MSCs
种属来源
人(Homo sapiens)
年龄性别
健康新生儿(性别不限,供体筛选无遗传疾病及感染史)
组织来源
脐带华通氏胶(Wharton's Jelly)
生长特性
贴壁生长(依赖特定细胞外基质支持)
细胞形态
长梭形或成纤维细胞样,单层培养时呈放射状排列
细胞代数
P3 - P8(确保多向分化潜能及基因组稳定性)
细胞规格
1×10^5 cells/T25培养瓶 或 1mL冻存管(含无血清冻存液)
培养基
MSC专用培养基(含10% FBS + 基础生长因子添加剂)
培养条件
气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件
无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂),-150℃以下长期保存
倍增时间
48 - 72小时(受传代密度及培养基活性影响)
供应限制
仅限科学研究使用,不可用于临床治疗或体内实验
二、细胞培养操作指南
收货处理
• 冻存管:37℃水浴快速解冻,离心后重悬于预热培养基
• 培养瓶:75%酒精表面消毒后静置培养箱平衡1小时
传代标准
细胞融合度达80% - 90%(推荐每4 - 5天传代一次)
传代比例
1:2至1:3(建议接种密度1×10⁴ cells/cm²)
消化方法
• 使用0.25% Trypsin - EDTA(含酚红指示)
• 37℃消化3 - 5分钟,轻柔吹打至细胞完全脱落
注意事项
• 避免消化过度(影响细胞表面标志物表达)
• 首次换液时间建议在传代后48小时内
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方
无血清冻存液(含10% DMSO及血清替代物)
细胞密度
冻存浓度:1×10⁶ - 2×10⁶ cells/mL
冻存步骤
• 离心收集细胞后轻柔重悬于预冷冻存液
• 梯度降温程序:4℃ 30分钟 → -20℃ 2小时 → -80℃过夜 → 液氮长期存储
复苏验证
• 复苏后24小时活率检测(台盼蓝染色法≥90%)
• 功能验证:三系分化能力检测(成骨/成脂/成软骨诱导实验)
四、售后服务承诺
重发标准
1. 运输过程中温度异常导致细胞失活(需提供物流温度记录)
2. 7天内证实微生物污染(需提供第三方检测报告)
3. 复苏后活率低于85%(经双方复核确认)
4. 细胞表面标志物鉴定与承诺不符(流式检测数据异常)
不予重发情形
1. 收货后超72小时未进行复苏操作
2. 使用非推荐培养基或血清导致细胞特性改变
3. 未按规范进行冻存导致细胞反复冻融损伤
4. 未完成无菌检测直接进行共培养实验
以上内容基于标准操作流程编写,具体实验条件需根据实际研究需求优化。