一、细胞基本属性
- 细胞名称:人脐动脉平滑肌细胞(Human Umbilical Artery Smooth Muscle Cells)
- 细胞别称:HUASMC;脐动脉平滑肌细胞;血管平滑肌细胞
- 种属来源:人(Homo sapiens)
- 年龄性别:健康足月新生儿(性别不限,供体筛选无遗传或代谢性疾病史)
- 组织来源:脐动脉中膜层(经胶原酶消化分离)
- 生长特性:贴壁生长(依赖细胞外基质包被)
- 细胞形态:典型长梭形,平行排列呈束状结构
- 细胞代数:P3 - P8(保持收缩功能与表型稳定性)
- 细胞规格:1×10^5 cells/T25培养瓶 或 1mL冻存管(含无血清冻存液)
- 培养基:平滑肌细胞专用培养基(含10% FBS + 生长因子添加剂)
- 培养条件:气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含DMSO及细胞保护剂), - 150℃以下长期保存
- 倍增时间:~48 - 72小时(受血清浓度及机械牵张影响)
- 供应限制:仅限科研用途,不可用于临床或药物生产
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,离心后重悬于预热培养基
- 培养瓶:酒精消毒表面后静置培养箱平衡1小时
- 传代标准:细胞融合度达80% - 90%(每3 - 5天传代一次)
- 传代比例:1:2至1:3(建议接种密度3×10³ cells/cm²)
- 消化方法:
- 使用0.25% Trypsin - EDTA(含0.02% EDTA)
- 37℃消化3 - 5分钟,轻柔吹打至细胞脱落
- 注意事项:
- 避免连续传代导致表型丢失(建议定期检测α - SMA表达)
- 消化后需完全中和胰酶,防止细胞收缩过度
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO及葡萄糖)
- 细胞密度:冻存浓度:1×10⁶ - 3×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤:
- 离心收集细胞后轻柔混悬于冻存液
- 程序降温:4℃ 30min → -20℃ 2h → -80℃过夜 → 液氮保存
- 复苏验证:
- 复苏后48小时检测存活率(台盼蓝染色≥90%)
- 功能验证:免疫荧光检测α - SMA及Calponin表达
四、售后服务承诺
- 重发标准:
1. 运输过程温度异常导致细胞失活(需提供物流温度记录)
2. 72小时内证实微生物污染(需提供污染检测报告)
3. 细胞复苏存活率低于85%(需提供染色检测视频)
4. 细胞标志物检测与承诺不符(需提供第三方检测结果)
- 不予重发情形:
1. 超时复苏(冻存管解冻后未及时接种)
2. 自行更改培养基配方导致功能异常
3. 未按规范进行细胞传代(如机械刮取代替酶消化)
4. 实验操作污染导致细胞交叉感染
注:所有操作需符合生物安全规范,建议使用原代细胞专用培养耗材。