一、细胞基本属性
1. 细胞名称：人脐静脉平滑肌细胞（Human Umbilical Vein Smooth Muscle Cells）
2. 细胞别称：HUVSMC；脐静脉平滑肌细胞；血管平滑肌细胞
3. 种属来源：人（Homo sapiens）
4. 年龄性别：健康成人（性别不限，供体筛选无血管疾病史）
5. 组织来源：脐静脉中膜层
6. 生长特性：贴壁生长（依赖细胞外基质及特定生长因子）
7. 细胞形态：典型长梭形，融合后呈“峰谷”交错排列
8. 细胞代数：P3 - P8（维持收缩功能及表型稳定性）
9. 细胞规格：1×10^5 cells/T25培养瓶 或 1mL冻存管（含无血清冻存液）
10. 培养基：平滑肌细胞专用培养基（含5% FBS + 平滑肌生长因子添加剂）
11. 培养条件：气相：5% CO₂ + 95%空气；温度：37℃；湿度：95%
12. 冻存条件：无血清冻存液（含10% DMSO及细胞保护剂）， - 150℃以下长期保存
13. 倍增时间：~72 - 96小时（依赖培养密度及生长因子浓度）
14. 供应限制：仅限科研用途，不可用于临床诊疗或动物实验
二、细胞培养操作指南
1. 收货处理：
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，加5mL预热培养基混匀离心
- 培养瓶：75%酒精表面消毒后静置培养箱2小时平衡
2. 传代标准：细胞融合度达80% - 90%（通常每5 - 7天传代一次）
3. 传代比例：1:2至1:3（推荐接种密度3×10³ cells/cm²）
4. 消化方法：
- 使用0.25% Trypsin - EDTA（含Ca²⁺/Mg²⁺）
- 37℃消化3 - 5分钟，镜下观察细胞边缘卷曲后终止
5. 注意事项：
- 避免剧烈吹打（防止肌丝结构损伤）
- 传代后48小时内避免频繁移动培养瓶
三、细胞冻存操作规范
1. 冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO及糖原保护剂）
2. 细胞密度：冻存浓度：5×10⁵ - 1×10⁶ cells/mL
3. 冻存步骤：
- 离心收集细胞后轻柔重悬于冻存液
- 程序降温：4℃ 30min → - 80℃过夜 → 转入液氮
4. 复苏验证：
- 复苏后48小时台盼蓝染色检测存活率（保证≥85%）
- 功能验证：α - SMA免疫荧光染色（P5代细胞阳性率应≥95%）
四、售后服务承诺
1. 重发标准：
- 运输过程温度异常导致细胞死亡（需提供物流温度记录）
- 7天内证实细菌/真菌污染（需提供污染样本检测图）
- 细胞复苏存活率低于85%（需提供台盼蓝染色结果）
- 标志物鉴定与说明书不符
2. 不予重发情形：
- 客户未按推荐培养基及传代流程操作
- 解冻后培养超过72小时未换液导致状态异常
- 未使用程序降温设备直接冻存
- 实验操作污染导致细胞交叉感染
注：以上内容基于标准操作流程制定，实际应用需结合实验室具体条件调整。
