一、细胞基本属性
- 细胞名称:人羊膜上皮细胞(Human Amniotic Epithelial Cells)
- 细胞别称:hAEC;羊膜上皮细胞
- 种属来源:人(Homo sapiens)
- 年龄性别:健康足月妊娠产妇(胎盘来源,供体筛查无传染性疾病及遗传病史)
- 组织来源:足月胎盘羊膜层上皮组织
- 生长特性:贴壁生长(依赖胶原蛋白或特定细胞外基质涂层)
- 细胞形态:铺展后呈扁平多角形,细胞核清晰,单层排列紧密
- 细胞代数:P3 - P6(维持干细胞特性及功能稳定性)
- 细胞规格:1×10^5 cells/T25培养瓶 或 1mL冻存管(含无血清冻存液)
- 培养基:Epithelial Cell Medium(含1% FBS + 上皮细胞特异性生长因子)
- 培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂), - 150℃以下长期保存
- 增殖能力:倍增时间约48 - 72小时(依赖传代密度及培养条件)
- 供应限制:仅限科学研究使用,不可用于临床治疗或商业用途
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,加入5mL预热培养基轻柔混匀离心
- 培养瓶:75%酒精表面消毒后直接置于37℃培养箱静置4小时
- 传代标准:细胞融合度达80% - 90%(建议每5 - 7天传代一次)
- 传代比例:1:2至1:3(推荐初始接种密度4×10³ cells/cm²)
- 消化方法:
- 使用0.25%胰酶 - EDTA溶液(含钙镁离子螯合剂)
- 37℃消化3 - 5分钟,显微镜下观察细胞边缘卷曲后终止消化
- 注意事项:
- 避免过度传代导致干细胞特性丧失(建议不超过P6代)
- 首次换液需在贴壁后24小时内完成,去除未贴壁细胞碎片
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO及海藻糖保护剂)
- 细胞密度:推荐冻存浓度1×10⁶ - 1.5×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤:
- 消化后细胞离心重悬于冻存液,分装至冻存管
- 程序降温:4℃平衡30分钟→ - 80℃过夜→液氮长期保存
- 复苏验证:
- 复苏后48小时内检测细胞活性(台盼蓝染色存活率≥90%)
- 功能验证:免疫荧光染色CK19阳性率>95%(P3代细胞)
四、售后服务承诺
- 重发标准:
1. 运输过程中温度记录异常导致细胞失活(需提供物流温度监控报告)
2. 收到后72小时内证实微生物污染(需提供第三方检测证明)
3. 细胞贴壁率低于80%(需提供接种后24小时显微图像)
4. 细胞标志物检测与说明书不符(需提供STR或流式检测数据)
- 不予重发情形:
1. 未按操作指南进行预涂层处理导致贴壁失败
2. 使用含高浓度血清(>5%)培养基引发细胞分化
3. 自行修改培养条件(如温度、CO₂浓度)导致的异常
4. 未按要求进行定期支原体检测造成的污染扩散
注:本产品需在生物安全二级实验室规范操作,相关实验需符合伦理审查要求。