一、细胞基本属性
细胞名称
人胎盘微血管内皮细胞(Human Placental Microvascular Endothelial Cells)
细胞别称
HPMVEC;胎盘微血管内皮细胞;胎盘血管内皮细胞
种属来源
人(Homo sapiens)
年龄性别
健康成人(性别不限,供体筛选无妊娠并发症史)
组织来源
胎盘组织微血管段
生长特性
贴壁生长(依赖基质胶或纤维连接蛋白包被)
细胞形态
单层铺展呈鹅卵石样排列,接触抑制后呈现规则多边形
细胞代数
P3 - P8(经严格质控确保功能稳定性)
细胞规格
1×10^5 cells/T25培养瓶 或 1mL冻存管(含无血清冻存液)
培养基
内皮细胞专用培养基(含5% FBS及血管生成因子补充剂)
培养条件
气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件
无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂),液氮长期保存
倍增时间
约48 - 60小时(与培养密度及生长因子浓度相关)
供应限制
仅用于科学研究,禁止临床或诊断用途
二、细胞培养操作指南
收货处理
• 冻存管:37℃水浴快速解冻后,转移至含5mL预温培养基的离心管,1000rpm离心5分钟
• 培养瓶:酒精表面消毒后直接置于37℃培养箱平衡4小时
传代标准
融合度达80% - 90%时传代(建议培养周期不超过72小时)
传代比例
1:2至1:3(推荐接种密度1×10^4 cells/cm²)
消化方法
• 使用0.25%胰蛋白酶 - EDTA溶液(含0.02% EDTA)
• 37℃消化2 - 3分钟,显微镜下观察细胞边缘卷曲即终止
注意事项
• 严格控制消化时间以保护紧密连接蛋白
• 首次换液需在接种后12小时内完成
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方
无血清冻存液(含10% DMSO及海藻糖保护剂)
细胞密度
冻存浓度:5×10^5 - 1×10^6 cells/mL
冻存步骤
• 消化收集细胞后以冻存液重悬
• 程序降温:4℃预冷30分钟 → -80℃过夜 → 液氮长期保存
复苏验证
• 复苏存活率≥90%(台盼蓝染色法)
• 功能检测:CD31免疫荧光鉴定及血管形成实验(P5代细胞需保持成管能力)
四、售后服务承诺
重发标准
1. 运输温度异常导致细胞失活(需提供温度记录证明)
2. 72小时内证实微生物污染(需提供污染检测报告)
3. 细胞复苏存活率低于承诺值
4. 细胞STR分型与备案不一致
不予重发情形
1. 解冻后超48小时未进行培养操作
2. 擅自更改培养基配方或培养条件
3. 未按要求进行定期支原体检测
4. 反复冻融导致细胞功能受损