一、细胞基本属性
- 细胞名称：人结膜下囊成纤维细胞
- 细胞别称：结膜成纤维细胞；结膜基质细胞
- 种属来源：人（Homo sapiens）
- 年龄性别：健康成人（性别不限，供体筛选无眼部疾病史）
- 组织来源：结膜下囊组织
- 生长特性：贴壁生长（依赖胶原蛋白基质支持）
- 细胞形态：长梭形或星形，胞质伸展明显，核仁清晰
- 细胞代数：P3 - P8（保持增殖活性与分泌功能稳定性）
- 细胞规格：1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含无血清冻存液）
- 培养基：DMEM/F12（含10% FBS + 成纤维细胞生长因子）
- 培养条件：气相：5% CO₂；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含DMSO及细胞保护剂），-150℃以下长期保存
- 倍增时间：约48 - 60小时（视培养密度及生长因子浓度）
- 供应限制：仅限科研用途，不可用于临床或动物实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理：
- 冻存管：37℃水浴快速解冻后转移至含5mL培养基的离心管，1000rpm离心3分钟，弃上清重悬接种
- 培养瓶：酒精消毒表面后直接置于培养箱，静置4小时待细胞贴壁
- 传代标准：融合度达90% - 95%（建议每4 - 5天传代）
- 传代比例：1:2至1:3（推荐接种密度3×10³ cells/cm²）
- 消化方法：
- 使用0.25%胰酶 - EDTA溶液
- 37℃消化2 - 3分钟，显微镜下观察细胞边缘卷曲后终止
- 注意事项：
- 避免消化过度导致细胞膜损伤
- 传代后48小时内避免频繁移动培养瓶
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO及海藻糖保护剂）
- 细胞密度：1×10⁶ - 2×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤：
- 离心收集细胞，重悬于预冷冻存液
- 程序降温：4℃平衡30分钟→ - 80℃冷冻过夜→液氮长期保存
- 复苏验证：
- 复苏存活率≥90%（台盼蓝染色法）
- 功能验证：胶原分泌检测（P5代细胞应维持Ⅰ/Ⅲ型胶原分泌能力）
四、售后服务承诺
- 重发标准：
1. 运输过程温度异常导致细胞死亡（需提供物流温度记录）
2. 到货72小时内证实微生物污染（需提供无菌检测报告）
3. 细胞存活率低于85%（附复苏后显微照片）
4. 细胞STR谱系与备案数据不符
- 不予重发情形：
1. 未按规范进行传代导致细胞老化
2. 使用非推荐培养基或血清批次
3. 反复冻融或长时间常温暴露
4. 未执行建议的细胞功能验证流程
