一、细胞基本属性
细胞名称:人眼眶成纤维细胞(Human Orbital Fibroblasts)
细胞别称:HOF;眼眶结缔组织细胞;眼周成纤维细胞
种属来源:人(Homo sapiens)
年龄性别:健康成人(性别不限,供体无眼部疾病或创伤史)
组织来源:眼眶结缔组织
生长特性:贴壁生长(依赖胶原蛋白或纤维连接蛋白包被)
细胞形态:长梭形或星形,呈放射状或漩涡状排列
细胞代数:P3 - P8(维持细胞功能稳定性与分化潜能)
细胞规格:1×10^5 cells/T25培养瓶 或 1mL冻存管(含无血清冻存液)
培养基:DMEM/F12(含10% FBS + 1%非必需氨基酸 + 2mM L - 谷氨酰胺)
培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件:无血清冻存液(含DMSO及细胞保护剂),液氮长期保存
倍增时间:约48 - 72小时(受细胞密度与培养基质影响)
供应限制:仅限科学研究,不可用于临床或体内实验
二、细胞培养操作指南
收货处理:
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,加入5mL预热培养基轻柔混匀
- 培养瓶:75%酒精表面消毒后静置于培养箱平衡1小时
传代标准:细胞融合度达80% - 90%(建议每3 - 5天传代)
传代比例:1:2至1:3(推荐接种密度3×10³ cells/cm²)
消化方法:
- 使用0.25% Trypsin - EDTA(含0.02%胶原酶)
- 37℃消化3 - 5分钟,显微镜下确认细胞边缘卷曲后终止
注意事项:
- 消化终止时加入含血清培养基充分中和
- 首次换液需在传代后48小时内完成
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO及胎牛血清替代物)
细胞密度:冻存浓度1×10⁶ - 2×10⁶ cells/mL
冻存步骤:
- 预冷冻存管,细胞悬液分装后密封标记
- 梯度降温:4℃ 30分钟 → -20℃ 2小时 → -80℃过夜 → 液氮长期储存
复苏验证:
- 复苏后48小时检测细胞贴壁率(标准≥85%)
- 功能验证:α - SMA免疫荧光染色(P5代细胞应保持活化潜能)
四、售后服务承诺
重发标准:
1. 运输过程温度异常导致细胞失活(需提供物流温度记录)
2. 到货72小时内证实微生物污染(需提供检测报告)
3. 细胞复苏存活率低于90%(台盼蓝染色法)
4. 细胞STR谱系与数据库不匹配
不予重发情形:
1. 未按规范进行细胞复苏或延迟操作超72小时
2. 自行更换培养基导致细胞形态异常
3. 实验操作不当引发支原体交叉污染
4. 未执行推荐传代流程导致的增殖能力下降
(注:本产品经伦理学审查,所有供体信息均匿名化处理,符合国际生物样本使用规范)