一、细胞基本属性
细胞名称
人牙龈干细胞(Human Gingival Mesenchymal Stem Cells)
细胞别称
GMSCs;牙龈间充质干细胞;牙龈组织来源干细胞
种属来源
人(Homo sapiens)
年龄性别
健康成人(性别不限,供体经口腔健康筛查无炎症或病变史)
组织来源
牙龈结缔组织(手术切除的健康牙龈样本)
生长特性
贴壁生长(依赖胶原或纤连蛋白包被培养器皿)
细胞形态
长梭形或纺锤状,单层贴壁后呈均匀分布
细胞代数
P3 - P8(维持多向分化潜能与基因组稳定性)
细胞规格
1×10^5 cells/T25培养瓶 或 1mL冻存管(无血清冻存体系)
培养基
间充质干细胞专用培养基(含10% FBS + 基础生长因子组合)
培养条件
气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件
无血清冻存液(含8% DMSO及细胞保护剂),液氮长期保存
倍增时间
约48 - 60小时(受细胞密度与传代次数影响)
供应限制
仅限科学研究,不可用于临床治疗或生物医药产品开发
二、细胞培养操作指南
收货处理
· 冻存管:37℃水浴快速解冻,轻柔离心后重悬于预热培养基
· 培养瓶:表面消毒后静置培养箱4小时恢复贴壁
传代标准
细胞融合度达80% - 90%(推荐每4 - 5天传代一次)
传代比例
1:2至1:3(初始接种密度建议3×10³ cells/cm²)
消化方法
· 使用0.25% Trypsin - EDTA(含1 mM EDTA)
· 37℃消化2 - 3分钟,细胞边缘卷曲时立即终止
注意事项
· 避免机械吹打过猛(防止细胞膜损伤)
· 传代后48小时内观察细胞贴壁状态,及时补充生长因子
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方
无血清冻存液(含8% DMSO、20% FBS及海藻糖)
细胞密度
冻存浓度:5×10⁵ - 1×10⁶ cells/mL
冻存步骤
· 离心收集细胞后轻柔重悬于冻存液
· 程序降温:4℃ 30min → -20℃ 1h → -80℃过夜 → 液氮储存
复苏验证
· 复苏后存活率≥90%(台盼蓝染色法确认)
· 功能验证:成骨/成脂诱导分化实验(P4代细胞应具备多向分化能力)
四、售后服务承诺
重发标准
1. 运输过程中干冰耗尽或温度异常(需提供物流温度记录)
2. 到货7天内经检测证实微生物污染(需提供第三方检测报告)
3. 细胞复苏后存活率低于85%(按规范操作前提下)
4. 细胞表面标志物(CD73/CD90/CD105)表达不符合标准
不予重发情形
1. 未按说明书要求进行预包被培养器皿
2. 自行修改培养基配方导致细胞分化异常
3. 解冻后未及时接种或多次冻融操作
4. 实验过程中未定期检测支原体污染
(注:以上内容基于科研级细胞产品通用规范编写,具体参数以实际产品说明书为准。)