一、细胞基本属性
细胞名称：人视网膜微血管内皮细胞（Human Retinal Microvascular Endothelial Cells）
细胞别称：HRMEC；视网膜微血管内皮细胞；视网膜动脉内皮细胞
种属来源：人（Homo sapiens）
年龄性别：健康成人（性别不限，供体筛选无视网膜病变史）
组织来源：视网膜组织微血管段
生长特性：贴壁生长（依赖细胞外基质成分）
细胞形态：典型单层铺路石样排列，接触抑制后呈规则多边形
细胞代数：P3 - P8（经功能验证确保代谢活性稳定）
细胞规格：1×10^5 cells/T25培养瓶 或 1mL冻存管（含无血清冻存液）
培养基：视网膜内皮专用培养基（含1% FBS + 血管生成因子组合）
培养条件：气相5% CO₂、温度37℃、湿度95%恒温培养箱
冻存条件：无血清冻存液（含DMSO及细胞保护剂），液氮气相长期保存
倍增时间：约48 - 60小时（与细胞密度及培养条件相关）
供应限制：仅供体外研究使用，禁止临床应用或体内实验
二、细胞培养操作指南
收货处理：
- 冻存管复苏：37℃水浴快速解冻，加入5mL预温培养基轻柔混匀
- 培养瓶处理：75%酒精表面消毒后静置培养箱平衡4小时
传代标准：融合度达80% - 90%时进行传代（建议培养周期3 - 5天）
传代比例：1:2至1:3分种（推荐初始密度4×10³ cells/cm²）
消化方法：
- 使用0.02% EDTA - 胰酶混合消化液
- 37℃消化30 - 60秒，显微镜下观察细胞间隙扩大后即刻终止
注意事项：
- 严格控制消化时间以保护紧密连接蛋白完整性
- 传代后12小时内更换新鲜培养基
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方：无血清细胞冻存液（含8% DMSO及糖原保护剂）
细胞密度：最佳冻存浓度1.2×10⁶ cells/mL
冻存步骤：
- 离心后轻柔重悬细胞于冻存液
- 程序降温：4℃平衡20分钟→ - 80℃梯度降温6小时→液氮贮存
复苏验证：
- 复苏后12小时检测细胞存活率（台盼蓝法≥90%）
- 功能验证：血视网膜屏障模型构建（P5代细胞应维持跨内皮电阻＞200Ω·cm²）
四、售后服务承诺
重发标准：
1. 物流温度记录仪显示超温（需提供运输全程温度曲线）
2. 到货72小时内证实微生物污染（需提供第三方检测报告）
3. 复苏存活率低于承诺标准（附显微成像及计数原始数据）
4. 细胞特异性标记物检测未达预期（如CD31/PECAM - 1表达缺失）
免责情形：
1. 细胞解冻后未在24小时内贴壁即判定异常
2. 使用非配套培养基或自行添加未经验证生长因子
3. 未按规范进行传代导致细胞提前衰老
4. 未定期进行支原体检测造成实验体系污染
