一、细胞基本属性
- 细胞名称:人视网膜Muller细胞(Human Retinal Muller Cells)
- 细胞别称:视网膜胶质细胞;Muller胶质细胞;视网膜支持细胞
- 种属来源:人(Homo sapiens)
- 年龄性别:健康成人(性别不限,供体筛选无眼部疾病史)
- 组织来源:视网膜组织(神经层)
- 生长特性:贴壁生长(依赖胶原或层粘连蛋白包被基质)
- 细胞形态:长梭形或星形,接触抑制后呈现网状交错排列
- 细胞代数:P3 - P8(确保功能活性及基因表达稳定性)
- 细胞规格:1×10^5 cells/T25培养瓶 或 1mL冻存管(含无血清冻存液)
- 培养基:DMEM/F12培养基(含5% FBS + 2mM谷氨酰胺 + 成纤维细胞生长因子)
- 培养条件:气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含8% DMSO及细胞保护剂),-150℃以下长期保存
- 倍增时间:~60 - 84小时(依赖细胞密度及基质包被条件)
- 供应限制:仅限体外研究使用,不可用于临床治疗或体内实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,加入5mL预热培养基轻柔混匀离心。
- 培养瓶:酒精擦拭表面后静置于培养箱1小时,待温度稳定后换液。
- 传代标准:细胞融合度达80% - 90%(通常每4 - 5天传代一次)
- 传代比例:1:2至1:3(推荐接种密度4×10³ cells/cm²)
- 消化方法:
- 使用0.25% Trypsin - EDTA(含1mM EDTA)。
- 37℃消化2 - 3分钟,显微镜下观察细胞边缘卷曲后终止。
- 注意事项:
- 消化时轻摇培养瓶避免局部过度反应。
- 传代后12小时内避免频繁移动培养瓶以促进贴壁。
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:无血清冻存液(含8% DMSO + 10%蔗糖 + 缓冲体系)
- 细胞密度:冻存浓度:1×10⁶ - 1.5×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤:
- 离心去除培养基后缓慢加入冻存液重悬。
- 梯度降温:4℃ 20min → -20℃ 1.5h → -80℃ 12h → 液氮长期存储。
- 复苏验证:
- 复苏后48小时内进行活率检测(台盼蓝染色活率≥90%)。
- 功能验证:GFAP免疫荧光染色(P5代细胞应维持典型胶质细胞标记表达)。
四、售后服务承诺
- 重发标准:
1. 运输过程中液氮罐泄漏或温度异常(需提供物流温度记录)。
2. 到货72小时内证实微生物污染(需提供第三方检测报告)。
3. 复苏活率低于85%(需提供台盼蓝染色图像)。
4. 细胞特异性标记物鉴定未达标。
- 不予重发情形:
1. 客户未按推荐方法进行基质包被导致贴壁失败。
2. 使用含高浓度血清(>10%)培养基引发分化。
3. 自行修改冻存程序导致冰晶损伤。
4. 未执行定期支原体检测造成交叉污染。
(本产品数据基于标准实验条件,实际应用需根据具体研究需求优化参数。)