一、细胞基本属性
- 细胞名称：人脉络膜成纤维细胞（Human Choroidal Fibroblasts）
- 细胞别称：HCF；脉络膜基质细胞；脉络膜间质细胞
- 种属来源：人（Homo sapiens）
- 年龄性别：健康成人（性别不限，供体筛选无视网膜及脉络膜疾病史）
- 组织来源：脉络膜组织层（经显微分离技术获取）
- 生长特性：贴壁生长（依赖胶原蛋白基质）
- 细胞形态：长梭形或多角形，细胞质伸展明显
- 细胞代数：P3 - P8（经严格质量控制确保功能稳定性）
- 细胞规格：1×10^5 cells/T25培养瓶 或 1mL冻存管（含无血清冻存液）
- 培养基：DMEM/F12（含10% FBS+成纤维细胞生长因子添加剂）
- 培养条件：气相：5% CO₂；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含DMSO及细胞保护剂），-150℃以下长期保存
- 倍增时间：~48 - 60小时（视培养密度及传代条件）
- 供应限制：仅限科研用途，不可用于临床或体外诊断
二、细胞培养操作指南
- 收货处理：
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，离心去除冻存液后重悬于预热培养基
- 培养瓶：酒精擦拭表面后静置培养箱平衡1小时
- 传代标准：细胞融合度达80% - 90%（建议每3 - 4天传代）
- 传代比例：1:2至1:3（推荐接种密度4×10³ cells/cm²）
- 消化方法：
- 使用0.25%胰酶 - EDTA消化液
- 37℃消化2 - 3分钟，显微镜下观察细胞边缘卷曲后终止
- 注意事项：
- 避免消化过度（防止细胞外基质蛋白降解）
- 传代后12小时补充新鲜培养基以促进贴壁
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO及血清替代物）
- 细胞密度：1×10⁶ - 2×10⁶ cells/mL（离心后重悬）
- 冻存步骤：
- 细胞悬液分装至冻存管，标记批次及代数
- 程序降温：4℃ 30分钟 → -20℃ 2小时 → -80℃过夜 → 液氮长期储存
- 复苏验证：
- 复苏后24小时检测细胞存活率（台盼蓝染色≥90%）
- 功能验证：胶原分泌检测（P5代细胞应维持基质合成能力）
四、售后服务承诺
- 重发标准：
1. 运输过程温度异常导致细胞死亡（需提供物流温度记录）
2. 72小时内证实微生物污染（需提供第三方检测报告）
3. 细胞贴壁率低于80%（经影像学证据确认）
4. 细胞标志物检测与说明书不符
- 不予重发情形：
1. 未按规范进行细胞复苏（如超时水浴或直接室温解冻）
2. 使用非推荐培养条件导致细胞分化异常
3. 未定期检测支原体造成实验数据偏差
4. 自行改良培养基后引发的功能异常
