一、细胞基本属性
- 细胞名称：人视网膜色素上皮细胞（Human Retinal Pigment Epithelial Cells）
- 细胞别称：HRPE细胞；RPE细胞；视网膜色素上皮细胞
- 种属来源：人（Homo sapiens）
- 年龄性别：健康成人（性别不限，供体筛选无眼部疾病史）
- 组织来源：视网膜组织色素上皮层
- 生长特性：贴壁生长（依赖基底膜基质成分）
- 细胞形态：单层多角形或多边形，胞质富含黑色素颗粒
- 细胞代数：P3 - P8（确保功能活性与遗传稳定性）
- 细胞规格：1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含无血清冻存液）
- 培养基：专用视网膜上皮细胞培养基（含1% FBS + 生长因子复合物）
- 培养条件：气相：5% CO₂ + 95%空气；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含10% DMSO及细胞保护剂）， - 150℃以下长期保存
- 倍增时间：~72 - 96小时（依赖细胞密度与培养基质）
- 供应限制：仅限科学研究，不可用于临床治疗或动物实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理：
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，加入5mL预热培养基轻柔混匀。
- 培养瓶：75%酒精消毒表面，静置于培养箱内2小时平衡温湿度。
- 传代标准：细胞融合度达80% - 90%（建议每5 - 7天传代一次）。
- 传代比例：1:2至1:3（推荐初始接种密度4×10³ cells/cm²）。
- 消化方法：使用0.25% Trypsin - EDTA（含Ca²⁺/Mg²⁺平衡液），37℃消化3 - 5分钟，镜下观察细胞边缘卷曲后立即终止反应。
- 注意事项：避免消化时间过长导致色素颗粒流失；传代后48小时内避免频繁移动培养瓶以促进贴壁。
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO及糖原保护剂）。
- 细胞密度：冻存浓度：1×10⁶ - 2×10⁶ cells/mL。
- 冻存步骤：离心收集细胞后轻柔重悬于冻存液，分装至冻存管；梯度降温程序：4℃ 30分钟 → - 20℃ 2小时 → - 80℃过夜 → 转移至液氮长期储存。
- 复苏验证：复苏后24小时检测细胞存活率（台盼蓝染色法 ≥90%）；功能验证：吞噬功能检测（P5代细胞应维持光感受器外节吞噬能力）。
四、售后服务承诺
- 重发标准：
1. 运输期间温度异常导致细胞死亡（需提供物流温度记录证明）；
2. 收到后3日内证实微生物污染（需提供PCR/培养检测结果）；
3. 复苏后存活率低于90%（需提供染色检测图像）；
4. 细胞STR谱系与数据库不符。
- 不予重发情形：
1. 客户未按规范进行复苏操作（如解冻后延迟接种超过6小时）；
2. 使用非指定培养基或添加未经验证的生长因子；
3. 反复冻融导致细胞功能损伤；
4. 未执行定期支原体检测引发实验污染。
