一、细胞基本属性
细胞名称
人脉络膜微血管内皮细胞（Human Choroidal Microvascular Endothelial Cells）
细胞别称
HCMEC；脉络膜微血管内皮细胞；脉络膜血管内皮细胞
种属来源
人（Homo sapiens）
年龄性别
健康成人（性别不限，供体筛选无视网膜及脉络膜疾病史）
组织来源
脉络膜组织微血管段
生长特性
贴壁生长（依赖细胞外基质成分）
细胞形态
典型“铺路石样”单层，接触抑制后呈规则多角形
细胞代数
P3 - P8（经严格质控确保功能稳定性与遗传一致性）
细胞规格
1×10⁵ cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含无血清冻存液）
培养基
Endothelial Cell Medium（含2% FBS + 内皮细胞特异性生长因子）
培养条件
气相：5% CO₂ + 95%空气；温度：37℃；湿度：95%
冻存条件
无血清冻存液（含DMSO及细胞保护剂）， - 150℃以下长期保存
倍增时间
~48 - 72小时（与培养密度及基质条件相关）
供应限制
仅限科研用途，不可用于临床诊疗或动物实验
二、细胞培养操作指南
收货处理
• 冻存管：37℃水浴快速解冻后加入4mL预热培养基轻柔混匀
• 培养瓶：75%酒精表面消毒后静置培养箱平衡2小时
传代标准
细胞融合度达85% - 90%（建议每3 - 4天传代一次）
传代比例
1:2至1:3（推荐初始接种密度5×10³ cells/cm²）
消化方法
• 使用0.05% Trypsin - EDTA（无Ca²⁺/Mg²⁺）
• 37℃消化1 - 2分钟，显微镜下观察细胞边缘回缩后终止
注意事项
• 避免消化过度（防止细胞间连接复合体损伤）
• 传代后24小时更换新鲜培养基以去除酶残留
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方
无血清冻存液（含10% DMSO及细胞膜稳定剂）
细胞密度
冻存浓度1×10⁶ - 2×10⁶ cells/mL（离心后重悬）
冻存步骤
• 梯度降温程序：4℃ 30分钟 → - 20℃ 2小时 → - 80℃过夜 → 液氮长期储存
复苏验证
• 复苏后24小时台盼蓝染色存活率≥95%
• 功能验证：体外管腔形成实验（P5代细胞维持血管生成特性）
四、售后服务承诺
重发标准
1. 运输过程温度异常导致细胞失活（需提供干冰包装状态证明）
2. 收货3日内证实微生物污染（需提供第三方检测报告）
3. 复苏后细胞存活率低于90%（经台盼蓝染色确认）
4. STR基因分型与备案数据不符
不予重发情形
1. 客户延迟复苏超过72小时
2. 使用非指定培养基导致细胞功能异常
3. 多次冻融操作造成细胞损伤
4. 未按规范进行无菌检测直接开展实验
