一、细胞基本属性
1. 细胞名称：人晶状体上皮细胞（Human Lens Epithelial Cells）
2. 细胞别称：HLEC；晶状体上皮细胞；眼晶状体上皮细胞
3. 种属来源：人（Homo sapiens）
4. 年龄性别：健康成人（性别不限，供体筛选无眼部疾病史）
5. 组织来源：眼球晶状体前囊膜上皮层
6. 生长特性：贴壁生长（依赖基底膜基质支持）
7. 细胞形态：单层铺路石样排列，融合后呈扁平多角形
8. 细胞代数：P3 - P8（确保功能稳定性和低分化状态）
9. 细胞规格：1×10⁵ cells/T25培养瓶 或 1mL冻存管（含无血清冻存液）
10. 培养基：专用晶状体上皮细胞培养基（含2% FBS + 上皮生长因子添加剂）
11. 培养条件：气相：5% CO₂ + 95%空气；温度：37℃；湿度：95%
12. 冻存条件：无血清冻存液（含10% DMSO及细胞保护剂），-150℃以下长期保存
13. 倍增时间：~60 - 84小时（依赖培养密度与生长因子浓度）
14. 供应限制：仅限科学研究使用，不可用于临床治疗或动物活体实验
二、细胞培养操作指南
1. 收货处理
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，加入预热培养基低速离心去冻存液后重悬接种
- 培养瓶：酒精擦拭外表面，置于37℃培养箱静置4小时再换液
2. 传代标准：细胞融合度达80% - 90%（推荐传代周期5 - 7天）
3. 传代比例：1:2至1:3（建议接种密度4×10³ cells/cm²）
4. 消化方法：使用0.25%胰酶 - EDTA溶液（含0.02%胶原酶），37℃消化3 - 5分钟，显微镜下确认细胞边缘卷曲后终止反应
5. 注意事项
- 避免频繁观察扰动贴壁过程，首次换液需轻柔避免冲起细胞
- 传代后48小时需检测α - 晶状体蛋白表达以确认细胞特性
三、细胞冻存操作规范
1. 冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO及海藻糖保护剂）
2. 细胞密度：冻存浓度：1×10⁶ - 3×10⁶ cells/mL
3. 冻存步骤：离心收集细胞后缓慢滴加冻存液混匀，梯度降温程序：4℃平衡30分钟→ - 80℃过夜→液氮长期储存
4. 复苏验证
- 复苏后48小时检测细胞存活率（台盼蓝染色≥90%）
- 功能验证：免疫荧光检测PAX6和E - cadherin表达（P5代细胞应维持上皮特性）
四、售后服务承诺
1. 重发标准
- 物流温度异常导致细胞失活（需提供运输温度记录）
- 到货72小时内证实微生物污染（需提交第三方检测报告）
- 细胞复苏存活率低于85%（经双方复测确认）
- STR分型与备案数据不符
2. 不予重发情形
- 客户未按规范进行预包被培养皿处理
- 擅自使用高浓度血清或非推荐培养基
- 解冻后未及时接种导致二次冻融损伤
- 未执行晶状体上皮细胞专用培养流程引发异常
