一、细胞基本属性
细胞名称
人牙龈成纤维细胞(Human Gingival Fibroblasts)
细胞别称
HGF;牙龈成纤维细胞;口腔成纤维细胞
种属来源
人(Homo sapiens)
年龄性别
健康成人(性别不限,供体筛选无口腔疾病史)
组织来源
健康牙龈组织(手术切除的临床废弃样本)
生长特性
贴壁生长(依赖胶原蛋白包被基质)
细胞形态
长梭形或纺锤形,贴壁伸展后呈典型成纤维样形态
细胞代数
P3 - P8(保证增殖活性与功能稳定性)
细胞规格
1×10⁵ cells/T25培养瓶 或 1mL冻存管(含无血清冻存液)
培养基
成纤维细胞专用培养基(含10% FBS + 成纤维细胞生长因子添加剂)
培养条件
气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件
无血清冻存液(含DMSO及细胞保护剂), - 150℃以下长期保存
倍增时间
~36 - 48小时(依赖接种密度与培养基活性)
供应限制
仅限科研用途,不可用于临床治疗或药物生产
二、细胞培养操作指南
收货处理
冻存管:37℃水浴快速解冻,加入5mL预热培养基轻柔混匀
培养瓶:75%酒精表面消毒后静置培养箱1小时平衡
传代标准
细胞融合度达80% - 90%(通常每2 - 3天传代一次)
传代比例
1:2至1:4(推荐接种密度3×10³ cells/cm²)
消化方法
使用0.25% Trypsin - EDTA(含0.02% EDTA)
37℃消化2 - 3分钟,显微镜下观察细胞回缩后立即终止
注意事项
避免剧烈吹打(保护细胞外基质分泌功能)
传代后48小时内避免频繁移动培养瓶
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方
无血清冻存液(含10% DMSO及海藻糖保护剂)
细胞密度
冻存浓度:5×10⁵ - 1×10⁶ cells/mL
冻存步骤
离心收集细胞后轻柔重悬于冻存液
梯度降温程序:4℃ 30分钟 → - 20℃ 2小时 → - 80℃过夜 → 液氮长期储存
复苏验证
复苏后24小时检测细胞存活率(台盼蓝染色≥90%)
功能验证:胶原分泌能力检测(P5代细胞应维持ECM合成功能)
四、售后服务承诺
重发标准
1. 物流温度异常导致细胞死亡(需提供运输温度记录)
2. 5天内证实微生物污染(需提供污染检测报告)
3. 细胞贴壁率低于80%(需提供复苏后48小时显微照片)
4. STR分型与数据库信息不符
不予重发情形
1. 客户超时复苏(超过72小时未处理冻存管)
2. 自行更换培养基导致细胞功能异常
3. 未按要求进行胶原包被影响细胞贴壁
4. 实验操作污染导致交叉感染