一、细胞基本属性
1. 细胞名称:人口腔黏膜上皮细胞(Human Oral Mucosal Epithelial Cells)
2. 细胞别称:HOMEC;口腔上皮细胞;口腔黏膜细胞
3. 种属来源:人(Homo sapiens)
4. 年龄性别:健康成人(性别不限,供体筛选无口腔疾病史)
5. 组织来源:口腔黏膜组织(颊部或牙龈非角化区域)
6. 生长特性:贴壁生长(依赖胶原蛋白或纤维连接蛋白包被)
7. 细胞形态:单层铺路石样排列,接触抑制后呈扁平多角形
8. 细胞代数:P3 - P8(确保功能活性及增殖稳定性)
9. 细胞规格:5×10⁵ cells/T25培养瓶 或 1mL冻存管(含无血清冻存液)
10. 培养基:上皮细胞专用培养基(含低浓度胎牛血清及表皮生长因子)
11. 培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
12. 冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂),液氮长期保存
13. 倍增时间:约36 - 60小时(与培养基批次及接种密度相关)
14. 供应限制:仅用于体外研究,禁止临床或动物体内应用
二、细胞培养操作指南
1. 收货处理
- 冻存管:37℃水浴快速复苏,离心去冻存液后重悬于预热培养基
- 培养瓶:酒精擦拭外壁,静置培养箱1小时恢复气体平衡
2. 传代标准:细胞融合度达80% - 90%(建议每2 - 3天观察一次)
3. 传代比例:1:3至1:4(推荐初始密度1×10⁴ cells/cm²)
4. 消化方法
- 使用0.25%胰酶 - EDTA溶液(含钙离子螯合剂)
- 37℃消化2 - 3分钟,显微镜下确认细胞边缘回缩后终止
5. 注意事项
- 消化后轻柔吹打防止细胞碎片增多
- 首次传代后12小时需补加新鲜培养基
三、细胞冻存操作规范
1. 冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO及海藻糖保护剂)
2. 细胞密度:冻存浓度:1×10⁶ cells/mL
3. 冻存步骤
- 离心收集细胞,缓慢逐滴加入冻存液混匀
- 程序降温:4℃ 30分钟 → -80℃ 过夜 → 转移至液氮气相层
4. 复苏验证
- 复苏存活率≥90%(台盼蓝染色法)
- 功能验证:角蛋白免疫荧光染色(P5代细胞应保持典型上皮标志物表达)
四、售后服务承诺
1. 重发标准
- 运输温度异常导致细胞死亡(需提供物流温度记录凭证)
- 收货72小时内证实真菌/细菌污染(需提供污染检测影像)
- 复苏后存活率低于承诺值(需提供染色检测原始数据)
- 细胞STR谱系与数据库不匹配
2. 不予重发情形
- 未按说明书进行预包被处理导致贴壁失败
- 使用高浓度血清或非推荐生长因子
- 传代次数超过P10仍要求功能质控
- 未留存冻存备份导致实验中断
注:本产品符合ISO细胞培养品控标准,所有批次附细胞鉴定报告及支原体检测阴性证明。