一、细胞基本属性
1. 细胞名称：人淋巴结成纤维细胞（Human Lymph Node Fibroblasts）
2. 细胞别称：HNLF；淋巴结基质细胞；淋巴成纤维细胞
3. 种属来源：人（Homo sapiens）
4. 年龄性别：健康成人（性别不限，供体筛选无免疫系统疾病史）
5. 组织来源：淋巴结组织（经手术切除的病理学正常样本）
6. 生长特性：贴壁生长（依赖胶原蛋白或纤维连接蛋白包被）
7. 细胞形态：典型长梭形或星形，融合后呈网状交错排列
8. 细胞代数：P3 - P8（维持细胞功能稳定性与低传代变异风险）
9. 细胞规格：1×10^5 cells/T25培养瓶 或 1mL冻存管（含无血清冻存液）
10. 培养基：Fibroblast Growth Medium（含10% FBS + 成纤维细胞特异性添加剂）
11. 培养条件：气相：5% CO₂ + 95%空气；温度：37℃；湿度：95%
12. 冻存条件：无血清冻存液（含10% DMSO及细胞保护剂），-150℃以下长期保存
13. 倍增时间：~36 - 48小时（依赖细胞密度及培养基补充因子）
14. 供应限制：仅限科研用途，不可用于临床治疗或体内实验
二、细胞培养操作指南
1. 收货处理
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，加入5mL预热培养基轻柔混匀
- 培养瓶：75%酒精表面消毒后静置培养箱1小时平衡温湿度
2. 传代标准：细胞融合度达80% - 90%（建议每2 - 3天传代一次）
3. 传代比例：1:3至1:4（推荐初始接种密度3×10³ cells/cm²）
4. 消化方法
- 使用0.25%胰酶 - EDTA溶液（含0.02% EDTA）
- 37℃消化3 - 5分钟，镜下观察细胞边缘卷曲后立即终止
5. 注意事项
- 避免机械刮取损伤细胞膜完整性
- 传代后48小时内避免频繁移动培养瓶以促进贴壁
三、细胞冻存操作规范
1. 冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO及营养保护剂）
2. 细胞密度：冻存浓度：1×10⁶ - 3×10⁶ cells/mL
3. 冻存步骤
- 离心收集细胞后轻柔重悬于预冷冻存液
- 梯度降温程序：4℃ 30分钟 → -20℃ 1小时 → -80℃过夜 → 液氮长期储存
4. 复苏验证
- 复苏后24小时台盼蓝染色检测存活率（标准≥90%）
- 功能验证：胶原分泌检测（P5代细胞应保持基质生成活性）
四、售后服务承诺
1. 重发标准
- 运输过程温度记录异常导致细胞失活（需提供物流温度监控截图）
- 到货7天内证实微生物污染（需提供第三方检测报告）
- 复苏后细胞存活率低于承诺值（台盼蓝染色法复核）
- STR鉴定与数据库信息不匹配
2. 不予重发情形
- 未按规范进行细胞复苏（如超时解冻或未预温培养基）
- 自行更换培养基导致细胞功能异常
- 反复冻融或不当操作引发细胞损伤
- 未执行建议的支原体检测流程直接开展实验
注：所有操作需遵守生物安全规范，细胞特性可能因个体差异存在合理波动。
