一、细胞基本属性
- 细胞名称：人脾脏单核细胞（Human Spleen Mononuclear Cells）
- 细胞别称：HSMC；脾单核细胞；脾单个核细胞
- 种属来源：人（Homo sapiens）
- 年龄性别：健康成人（性别不限，供体筛选无脾脏疾病史）
- 组织来源：脾脏组织单核细胞分离纯化
- 生长特性：悬浮生长（需定期轻柔吹打维持单细胞状态）
- 细胞形态：圆形或类圆形，悬浮状态下呈单个核特征
- 细胞代数：P2 - P6（保证细胞活性与功能稳定性）
- 细胞规格：1×10^6 cells/T25培养瓶 或 1mL冻存管（含无血清冻存液）
- 培养基：RPMI 1640培养基（含10% FBS + 单核细胞特异性添加剂）
- 培养条件：气相：5% CO₂ + 95%空气；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含10% DMSO及细胞保护剂），-150℃以下长期保存
- 增殖特性：~72 - 96小时（依赖细胞密度与刺激因子添加）
- 供应限制：仅限科研用途，不可用于临床诊疗或动物实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理：
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，离心去除冻存液后重悬于预热培养基
- 培养瓶：75%酒精擦拭外壁，静置培养箱1小时平衡后更换新鲜培养基
- 传代标准：细胞密度达1×10^6 cells/mL（悬浮培养）或活力下降至90%以下
- 传代比例：1:2至1:3（推荐接种密度2×10^5 cells/mL）
- 收集方法：
- 直接离心（200g，5分钟）收集细胞，避免过度离心损伤膜结构
- 重悬时使用预温培养基轻柔混匀
- 注意事项：
- 避免频繁观察扰动细胞悬浮状态
- 添加IL - 2或GM - CSF可增强细胞活性（根据实验需求）
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO + 海藻糖保护剂）
- 冻存密度：5×10^5 - 1×10^6 cells/mL
- 冻存步骤：
- 离心收集细胞，重悬于冻存液并分装至冻存管
- 梯度降温：4℃ 30分钟 → -80℃ 24小时 → 液氮长期保存
- 复苏验证：
- 复苏后12小时台盼蓝染色检测存活率（≥85%为合格）
- 功能验证：CD14/CD16表面标志物流式检测（P3代细胞需符合纯度≥95%）
四、售后服务承诺
- 重发标准：
1. 运输过程温度失控（需提供物流温度记录证据）
2. 到货3日内证实细菌/真菌污染（需提供第三方检测报告）
3. 细胞存活率低于85%（台盼蓝染色法复检）
4. 细胞表面标志物鉴定与说明书不符
- 不予重发情形：
1. 未在24小时内完成细胞复苏或离心步骤
2. 自行添加未经验证的细胞因子或刺激剂
3. 长时间静置培养导致细胞聚集或失活
4. 未按规范进行无菌操作引发交叉污染
