一、细胞基本属性
- 细胞名称:人细胞因子诱导的杀伤细胞(Human Cytokine - Induced Killer Cells)
- 细胞别称:CIK细胞;细胞因子激活杀伤细胞
- 种属来源:人(Homo sapiens)
- 年龄性别:健康成人(性别不限,供体筛选无免疫系统疾病史)
- 组织来源:外周血单核细胞(经体外刺激扩增)
- 生长特性:悬浮聚集生长(依赖细胞因子激活与扩增)
- 细胞形态:圆形或类淋巴细胞样,成簇分布
- 细胞代数:P0 - P3(体外扩增阶段,保持高杀伤活性)
- 细胞规格:5×10^6 cells/冻存管(含无血清冻存液)
- 培养基:CIK专用培养基(含10% FBS + IL - 2/IFN - γ等细胞因子)
- 培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含DMSO及蛋白保护剂),-150℃以下长期保存
- 增殖特性:体外扩增周期约14 - 21天(细胞数量可增长数百倍)
- 供应限制:仅限科研用途,不可用于临床治疗或生物制品开发
二、细胞培养操作指南
- 收货处理
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,离心去除冻存液后重悬于预热培养基
- 直接接种于预铺培养皿的无血清培养基中
- 扩增标准
- 每3 - 4天补充IL - 2(100 - 300 IU/mL)维持活性
- 细胞密度维持1×10^6 - 2×10^6 cells/mL
- 收集方法
- 离心(300×g,5分钟)后更换新鲜培养基
- 避免剧烈吹打以保持细胞膜完整性
- 注意事项
- 定期检测细胞表型(CD3+/CD56+双阳性率应≥30%)
- 避免长期培养(超过P3代可能降低细胞毒性)
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO + 20% FBS)
- 细胞密度:冻存浓度:5×10^6 - 1×10^7 cells/mL
- 冻存步骤
- 离心收集细胞,重悬于冻存液后分装至冻存管
- 程序降温:4℃ 30分钟 → -80℃过夜 → 液氮长期保存
- 复苏验证
- 复苏后存活率≥85%(台盼蓝染色法)
- 功能验证:细胞毒性检测(效靶比10:1时杀伤率≥40%)
四、售后服务承诺
- 重发标准
1. 运输过程温度异常导致细胞失活(需提供物流温度记录)
2. 3天内证实细菌/真菌污染(需提供镜检及培养证据)
3. 细胞表型不符合标准(流式检测CD3+/CD56+<30%)
- 不予重发情形
1. 未按规范补充细胞因子导致活性丧失
2. 使用非专用培养基或未定期换液
3. 扩增培养超过推荐代数(P3代以上)
4. 未进行预实验验证细胞功能直接用于动物模型